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前言：
白癜风是一种后天获得的色素脱失性疾病。白癜风的发病机制包括自身免疫学说、黑素细胞自毁学说、神经化学因子学说、遗传学说等。临床上通常分为五型,即散发型、泛发型、节段型、局限型及面部/肢端型。近年来,Verson在试验中发现疱疹病毒与白癜风有一定关系,即疱疹病毒可能是白癜风发病的一个刺激因素;Grimes等也现38%的白癜风标本(12/29)存在巨细胞病毒DNA,但是并没有检测到单纯疱疹病毒、水痘带状疱疹病毒及人嗜T淋巴细胞病毒的DNA;Ailoglu等检测血清中人疱疹病毒6的IgG抗体,发现白癜风组比对照组的阳性率高。目前还没有报告明确指出单纯疱疹病毒和白癜风的关系,但是注射了单纯疱疹疫苗的小鸡(Smyth Line Chicken)患自身免疫白癜风的比例较高。
单纯疹病毒为嗜神经病毒,能够在神经内潜伏,机体免疫力低下时,疱疹病毒复制,侵袭神经引起单纯疱疹。单纯疱疹病毒也可以引起多形红斑。多形红斑是一种自限性炎症反应性疾病,皮损主要分布于手足及粘膜等处。实验证明HSVDNA存在于多形红斑的皮损中。面部肢端型白癜风是一种特殊类型的白癜风,皮损分布与多形红斑相似,所以我们推测HSV可能作为这两种疾病的始发因素,通过免疫机制或临床病理学反应侵袭了不同的靶位(角蛋白或黑素细胞)。为了验证这个假设,我们利用PCR技术检测血清中的HSVDNA,HSV阳性说明患者处于单纯疱疹感染期。同时用化学发光法检测白癜风患者和对照组血清中的HSV抗体。
材料和方法：
一、实验材料
(一)病例与标本
于中国医科大学皮肤科门诊(2009年～2010年)收集临床确诊的白癜风患者90例,其中42例男性,48例女性,年龄为4-70岁。病程为半个月到19年,包括泛发型2例,节段型6例,局限型7例,散发型50例,面部肢端型25例。其中急性期79例,稳定期11例。90例中23例有白癜风家族史。724例育龄期女性的HSV抗体结果作为阴性对照。5例急性期的单纯疱疹患者(2例生殖器疱疹,3例面部疱疹)做为阳性对照。
90例白癜风患者均采取5毫升外周血,血清分离出来,储存于-80℃冰箱里,用来检测单纯疱疹病毒1/2型-抗体及其血清中的单纯疱疹病毒DNA。同时采取5例单纯疱疹患者的皮损,提取其中的DNA以备用。
(二)主要试剂
1、DNA提取试剂盒(TIANampVirusDNA/RNAKit,离心柱型,版本号RP090326,目录号DP315);
2、LIAISON@HSV-1/2IgG,产品编号310800,生产批号075049;
3、LIAISON@HSV-1/2IgM,产品编号310820,生产批号077044/1;
4、PremixExTaqHotStartVersion(TaKaRaCode:DRR030A);
5、DL500DNAMarker(TaKaRaCode:D525A);
6、REGULARAGAROSEG-10(LOTNO:111860;ORIGIN;SPAIN)。
二、实验方法
PCR技术(polymerasechainreaction)检测白癜风血清中的单纯疱疹疱疹病毒DNA,及用化学发光法检测血清中单纯疱疹病毒抗体。
结果：
90例白癜风患者血清中均未检测到HSVDNA,5例单纯疱疹患者血清中未检测到HSVDNA,其中3例皮损中检测到HSVDNA。
90例白癜风患者中2例(2.22%)HSV-IgM阳性,78例(86.67%)HSV-IgG阳性。对照组84例(84/574,14.63%)HSV-IgM阳性,134例(134/150,89.33%)HSV-IgG阳性。
结论：
白癜风患者血清中均未检测到HSVDNA。白癜风患者单纯疱疹病毒抗体的阳性率与正常对照相比无显著差异(P＞0.05)。单纯疱疹病毒在白癜风发病机制中的作用无法确定,仍值得我们关注。