银耳多糖为乳化剂的槲皮素微乳制备及固化研究

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槲皮素是一种多羟基黄酮类化合物,具有抗癌、抗菌、抗氧化等生物活性。但由于其水溶性差,限制其应用。为了提高其溶解性和生物利用度,本文研究了槲皮素微乳的制备工艺,采用天然乳化剂银耳多糖来降低合成乳化剂的使用量,所形成的微乳体系较为稳定。但液体微乳在应用中存在诸多限制,所以,将含银耳多糖的槲皮素微乳用Si O2进行固化,以提高患者的适应性,使其更好地应用于临床。首先,建立槲皮素体外检测、分析方法,该方法专属性、精密度、重复性且溶液稳定性较好,适用于槲皮素的体外含量检测。并对所购买的银耳多糖进行红外光谱(FT-IR)分析,证明所购买的多糖是含有糖醛酸的酸性杂多糖。然后和常见的天然乳化剂进行乳化性比较,结果表明,银耳多糖的乳化性较优。最后通过溶解度考察、配伍试验筛选微乳的处方,最终确定油相为三乙酸甘油酯、乳化剂为银耳多糖和吐温80(T80),助乳化剂为聚乙二醇400(PEG400)。然后,研究槲皮素微乳的制备工艺,通过伪三元相图确定乳化剂银耳多糖和T80的比例为1:1,采用星点设计-效应面法建立模型,进行槲皮素微乳处方的优化,油相三乙酸甘油酯、乳化剂银耳多糖和T80、助乳化剂PEG400的比例分别为36%、23%、23%、18%。所得微乳外观呈现黄色,粒径为(25.04±0.94)nm,Zeta电位为(-13.20±0.68)m V,多分散指数(PDI)为0.311±0.030,载药量为(30.17±1.02)mg/g;溶出度实验表明,槲皮素60 min在人工肠液和人工胃液的累积溶出度为87.95%和81.38%;储存稳定性实验、高速离心和高温实验结果表明,微乳的质量稳定。接着,对含银耳多糖和不含银耳多糖的槲皮素微乳进行抗氧化实验。以维生素E作对比,分别探究了含银耳多糖和槲皮素微乳的总还原能力和对自由基(DPPH·、O2-·、ABTS+·、·OH)的清除能力。结果表明,在浓度为5~25 mg/m L时,含银耳多糖的槲皮素微乳比槲皮素微乳具有更好的还原能力和自由基清除能力,含银耳多糖的槲皮素微乳清除DPPH·IC50值为0.08 mg/m L,而槲皮素微乳的IC50值为0.34 mg/m L;含银耳多糖的槲皮素微乳清除O2-·IC50值为3.23 mg/m L,而槲皮素微乳的IC50值为3.45 mg/m L;含银耳多糖的槲皮素微乳清除ABTS+·IC50值为1.97 mg/m L,而槲皮素微乳的IC50值为2.48 mg/m L;含银耳多糖的槲皮素微乳清除·OH IC50值为0.50 mg/m L,而槲皮素微乳的IC50值为0.64 mg/m L。因此,含银耳多糖的槲皮素微乳具有较好的抗氧化能力。最后,研究固体微乳的制备工艺,选择的固体吸附剂为Si O2,通过粉末的流动性、溶出度等考察,确定槲皮素微乳和Si O2的比例为1:1制备固体微乳。溶出度考察,固体微乳在10 min左右已基本溶出,在人工肠液中累积溶出率最大,最终达到80.31%,在人工胃液和水中最终达到72.88%、54.70%。重分散性考察,固化后的槲皮素微乳粒径增大了1.8倍,PDI下降21.5%,电位下降26.5%,其稳定性更好。FT-IR分析表明,槲皮素被包埋在微乳体系中;差示扫描量热法(DSC)分析表明槲皮素可能以非晶状态存在于固体微乳中,加速稳定性实验结果表明,固体微乳稳定性较好。
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