山皂荚皂苷提取纯化工艺及种子营养成分分析

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我国山皂荚(Gleditsia Japonica.Miq)资源丰富,分布广泛,荚果产量大。其荚果含有大量的三萜皂苷,三萜皂苷是一种非常优良的非离子表面活性剂,工业开发价值大,并且具有多种生物活性,在医学上有抗炎抗菌抗癌等作用。荚果内含种子,量大,含有多种营养物质。为综合利用这一宝贵的植物资源,本论文首次系统地研究了山皂荚皂苷的提取、纯化工艺,并分析了其种子主要营养物质的组成。本实验首先将山皂荚总浸膏分离为皂苷部份和非皂菅部分。对皂苷部份进行系统纯化,通过硅胶层析得到总皂苷的纯品,并建立了山皂荚皂苷含量测定的标准体系。以皂苷粗品得率为指标,充分考虑设备要求、环境保护、实验成本等因素,选择超声波法作为提取手段。摸索皂苷提取过程中的各个单因素并分析。经过单因素试验,我们基本得出超声波提取造价皂苷的最佳工艺:药材超声前浸泡处理时间为20-60分钟;超声提取时间为30-60分钟;超声功率为50%-80%总功;固液比为:1/10-1/15。为得出确切工艺,设计了正交实验,以影响皂苷得率较为明显的提取时间、超声波功率、固液比作三因素三水平的正交实验。经三因素三水平正交试验,确定粗皂苷最佳超声波提取工艺为:70%乙醇作为提取剂,仪器最大功率的80%超声提取40分钟,固液比1/12。皂苷品质稳定性实验表明,山皂荚总皂苷在防吸湿、室温条件下放置8个月左右,质量可以得到保障。以上实验工作为山皂荚皂苷产品化大生产提供了技术指标参考。采用系统溶剂萃取(乙醚—氯仿—水饱和正丁醇)加非极性大孔吸附树脂纯化粗皂苷部份,通过树脂型号筛选,确定吸附、洗脱过程中各个影响因素的具体数据,分析得出最佳纯化工艺。选用DM-130型大孔吸附树脂,上样液浓度控制在3-4rmg/ml,pH值调至6.0,洗脱溶媒流速为2-3ml/min,可以得到很好的吸附效果。依次用8个柱体积蒸馏水、2个柱体积20%乙醇,4个柱体积70%乙醇以2-3ml/min的流速洗脱,收集70%乙醇部分洗脱液,可以得到纯度在70%以上的总皂苷。整个纯化工艺过程简单,设备要求低,纯化效果明显优于传统的醇-醚沉淀法。对山皂荚种子进行蛋白质组成的分析,证明其氨基酸组成稳定,谷氨酸含量达到了总组分的31%。对山皂荚种子油进行气谱分析,证明其富含不饱和脂肪酸和亚油酸,经济价值较大。
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