产VIM-2型金属β-内酰胺酶鲍曼不动杆菌耐药机制及同源性分析

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目的:探讨我院患者分离产VIM-2型金属β-内酰胺酶鲍曼不动杆菌(产VIM-2型MBL的AB)的碳青霉烯类抗生素耐药机制及同源性。方法:收集南昌大学第一附属医院收治的患者近3年分离的856株耐药鲍曼不动杆菌(AB)菌株。采用全自动微生物鉴定及药敏分析仪测定菌株对哌拉西林、氨曲南等15种抗菌药物的耐药性。改良Hodge试验筛选产碳青霉烯酶菌株;EDTA(亚胺培南-乙二胺四乙酸)筛选金属β-内酰胺酶;PCR及测序检测产碳青霉烯酶(VIM、NDM、KPC、IMP、OXA)、I类整合子(Intl1)及可变区、CarO等基因;十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析菌株外膜蛋白的改变;肠杆菌基因间保守重复一致序列(ERIC)-PCR对菌株进行基因分型,另对同一谱型菌株的来源及耐药基因进行分析。结果:筛选出400株PDR-AB对左氧氟沙星和复方磺胺甲噁唑的耐药率最低,分别为33.07%和48.19%;对其他13种抗生素耐药率为77.30%95.18%。改良Hodge试验显示240株耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌均产碳青霉烯酶,EDTA(亚胺培南-乙二胺四乙酸)显示80株产金属β-内酰胺酶;PCR及测序显示18株PDR-AB菌株携带blaVIM-2基因,且均呈现Intl1-VIM-2连锁携带型;16株携带blaNDM基因;133株携带blaTEM-1,195株携带blaOXA-23,188株携带blaarmA;blaTEM-1,blaOXA-23和blaarmA基因携带率分别为55.42%,81.25%和78.33%,未检测出其他已知耐药基因。18株VIM-AB菌株中,9株表现出CarO基因缺失,缺失率为50%。SDS-PAGE结果显示部分VIM-AB菌株的外膜蛋白CarO相对表达量有不同程度的改变。ERIC-PCR基因图谱显示其中18株产VIM-2型MBL的AB主要为6种基因型,A型6株,B型4株,C型3株,D型2株,E型2株,F型1株。结论:blaTEM-1,blaOXA-23和blaarmA仍是引起鲍曼不动杆菌耐药的主要机制之一;与此同时,产VIM-2、NDM型金属β内酰胺酶联合外膜蛋白CarO表达量改变也是导致患者PDR-AB碳青霉烯类耐药的重要机制之一
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