目的:利用小鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型和糖氧剥夺(oxygen glucose derive,OGD)神经元细胞模型,研究基于gp130/STAT3通路的IL-27对脑缺血再灌注损伤的保护机制。方法:1.健康SPF级小鼠随机分为假手术组(SHAM),模型组(MCAO),IL-27干预组(IL-27)共3组。造模后行神经行为学评估(包括Bederson评分和beam walking test评分)和氯化三苯四唑(triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色。IL-27干预组每日IL-27腹腔注射连续7日。采用ELISA法研究MCAO小鼠脑组织中相关炎症介质的表达;RTPCR研究信号传导与转录激活因子3(Signal Transduction and Activators of Transcription 3,STAT3)m RNA表达水平;Western blot研究磷酸化STAT3(Phosphorylated STAT3,p STAT3)表达水平。2.采用胎鼠皮层神经元细胞原代培养制备神经元细胞糖氧剥夺模型,通过检测LDH浓度,观察OGD对神经元细胞细胞毒性的影响;用流式细胞仪和Western blot方法,检测IL-27对OGD神经元细胞的凋亡和、p STAT3蛋白表达水平的影响;通过gp130 siRNA和IL-27干预OGD神经元细胞,观察gp130 siRNA对经IL-27处理的OGD神经元细胞p STAT3和Bcl2蛋白表达的影响;通过采用STAT3磷酸化阻断剂sttatic阻断STAT3的磷酸化,观察sttatic对经IL-27处理的OGD神经元细胞的p STAT3蛋白、Bcl2蛋白表达和细胞毒性的影响。结果:1.缺血再灌注7天后,Bederson评分和Beam walking test评分显示IL-27组评分分别为(1.60±0.55和2.20±0.45)均低于MCAO组评分(2.40±0.55和3.00±0.61)(均P<0.05);IL-27组脑梗死体积百分比(12.45±6.18%)较MCAO组(38.89±5.99%)减少(P<0.05);IL27组的促炎因子(TNF-α、IL-1β、MCP-1)的浓度(分别为232.24±26.59、36.16±6.63、28.70±2.47)均低于MCAO组(分别为473.70±36.34、51.85±10.19、68.16±7.69)(均P<0.05),抗炎因子(IL-10、TGFβ)(23.69±7.60、49.17±8.17)均高于MCAO组(12.56±3.78、25.45±5.49)(均P<0.05)。2.缺血再灌注7天后,IL-27组STAT3 m RNA的表达(3.15±0.60倍)高于MCAO组高(2.52±0.430倍)(P<0.05),IL-27组p STAT3表达(5728.80±368.11)也高于MCAO组(3025.20±647.74)(P<0.05))。3.IL-27组的LDH浓度(239.19±10.52)明显低于OGD组(371.65±43.34)(P<0.05);IL-27组总凋亡率(55.14±17.76%)低于OGD模型组(81.87±2.81%)(P<0.05)。4.OGD+gp130 siRNA+IL-27组p STAT3(1023.33±173.08)和Bcl2的表达水平(1320.0±244.06)均较OGD+CON+IL-27组(1426.0±196.55、1790±280.26)明显减少(均p<0.05),而且OGD+gp130 siRNA组p STAT3水平(650.0±239.74)和Bcl2的表达(879±204.59)均较OGD+CON组(1035.67±74.01、1035.67±74.01)明显减少(均P<0.05)5.OGD+IL-27+Stattic-10μM组的LDH浓度(231.05±18.09)与OGD组(234.71±16.41)的差异无统计学意义(P>0.05),OGD+IL-27+stattic-5μM组和OGD+IL-27组LDH浓度(98.90±6.11、130.94±12.03)高于OGD组(243.71±16.41)(均P<0.05);OGD+IL-27+stattic-10μM组p STAT3(674.33±173.32)和Bcl2表达水平(531±133.72)较OGD组(622.33±137.55、466±120.80)稍高,但差异无统计学意义(均P>0.05);而在OGD+IL-27+stattic-5μM组和OGD+IL-27组的p STAT3(1414.67±315.69、1373.67±277.29)和Bcl2(1050.33±272.26、901±234.04)的表达均高于OGD组(622.33±137.55、466±120.80)(均P<0.05)。结论:1、IL-27可以改善大脑缺血再灌注模型小鼠的运动功能和缩小梗死体积,抑制梗死部位促炎因子的表达并增加抑炎因子的表达。2、IL-27能减轻糖氧剥夺(OGD)对神经元细胞的细胞毒性,减少神经元细胞的凋亡。3、IL-27能促进STAT3 m RNA的表达、增加p STAT3蛋白表达。4、gp130 siRNA可以抑制IL-27促进STAT3磷酸化和增加Bcl2表达的作用。5、gp130 siRNA和Stattic能抑制IL-27对OGD神经元细胞的保护作用。总之,IL-27对脑缺血再灌注损伤的保护机制与IL-27调控gp130/STAT3信号通路的活化,促进抗凋亡蛋白Bcl2的表达有关。