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本研究采用PCR-SSCP和DNA测序技术,检测了中国美利奴羊(新疆型)品种共计418个个体在角蛋白关联蛋白基因KAP6.1、KAP8.1、KAP8.2、KRTAP9-2、KAP16.4-1和KAP16.4-2等基因位点位点的遗传变异,分析了其遗传结构和遗传多态性。同时,运用SAS8.1统计软件检验基因型与毛性状的关联程度,研究这5个KAP基因多态性对中国美利奴羊(新疆型)毛性状的遗传效应,旨在得到相应的分子遗传信息,获取与毛性状的相关的DNA标记,为绵羊遗传资源的保护、开发和利用奠定基础,改善与提高绵羊生产性能,以便为细毛羊分子育种提供理论依据。一、5个KAP基因在中国美利奴羊(新疆型)遗传多态性研究本试验选择5个KAP基因作为候选基因,利用primer primer5.0引物设计软件对相关基因分别设计6对引物,以中国美利奴羊(新疆型)为研究基础,利用PCR-SSCP技术进行遗传多态性分析。结果表明:KRTAP9-2、KAP8.1和KAP16.4-1基因位点出现4种不同带型,分别命名为AA、BB、CC、AB型;KAP6.1、KAP8.2和KAP16.4-2基因位点出现3种不同带型,分别命名为AA、BB、AB型。测序分析发现KRTAP9-2基因检测到4处突变,即34bpA/-,35bpC/A,46bpA/-,132bpG/C;KAP6.1基因位点检测到5处突变,即54bpC/T,162bpG/A,166bpC/A,167bpA/T,55bpA/-;KAP8.1基因位点检测到3处突变,即53bpC/-,62bp-/T,85bpC/A;KAP8.2基因位点测到2处突变,即133bpA/C,46bp-/A;KAP16.4-1基因位点检测到5处突变,即89bpG/A,188bpG/A,196bpA/T,190bpA/C,137bpG/A;KAP16.4-2基因位点检测到2处突变,即78bpG/C,35bpA/-。经χ2检验:中国美利奴羊(新疆型)在KRTAP9-2位点上均处于Hardy-Weinberg不平衡状态(P<0.01);KAP6.1、KAP8.1、KAP8.2、KAP16.4-1和KAP16.4-2等位点上均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P﹥0.05)。中国美利奴羊(新疆型)在5个KAP基因位点处于中度多态,PIC为0.25-0.50之间;KRTAP9-2、KAP6.1、KAP8.1、KAP8.2、KAP16.4-1和KAP16.4-2位点的多态信息含量(PIC)分别为0.384、0.364、0.484、0.375、0.486、0.351,即中国美利奴羊(新疆型)群体遗传变异处于中等水平。二、5个KAP基因位点与毛性状关联性研究通过对不同基因型各性状表型数据的最小二乘均值和标准误结果得出,对毛性状(鉴定时体重、毛长度评分、毛弯曲评分、毛细度评分、毛油汗评分、毛光泽评分、体格大小、剪毛量、平均直径、变异系数、弯曲数)与基因位点的关系进行了分析。结果表明(1)KRTAP9-2基因位点剪毛量的AA、AB、BB与CC基因型差异显著(P<0.05);因此KRTAP9-2基因可能作为中国美利奴羊(新疆型)剪毛量的有效分子标记。(2) KAP6.1基因位点毛细度评分和毛油汗评分的AB基因型与AA、BB基因型差异显著(P<0.05);因此KAP6.1基因可能作为中国美利奴羊(新疆型)毛细度评分和毛油汗评分的有效分子标记。(3)KAP8.1基因位点毛弯曲评分的BB基因型与AB基因型和毛细度评分的AA、AB、BB基因型与CC基因型差异显著(P<0.05);因此KAP8.1基因可能作为中国美利奴羊(新疆型)毛细度评分和毛弯曲评分的有效分子标记。(4)KAP8.2基因位点剪毛量的BB基因型与AB基因型差异显著(P<0.05);因此KAP8.2基因可能作为中国美利奴羊(新疆型)剪毛量的有效分子标记。(5)KAP16.4-1基因位点毛弯曲评分的CC基因型与AB基因型,剪毛量的AB基因型与AA、BB、CC基因型和变异系数的CC基因型与AA、AB基因型差异显著(P<0.05);因此KAP16.4-1位点可能作为中国美利奴羊(新疆型)剪毛量和毛变异系数的有效分子标记。(6)KAP16.4-2基因位点标记毛油汗评分和毛光泽评分的AB基因型与AA、BB基因型差异显著(P<0.05),因此KAP16.4-2位点可能作为中国美利奴羊(新疆型)毛油汗评分和毛光泽评分的有效分子标记。其它基因型个体间差异无显著性影响(P>0.05)。三、5个KAP基因位点聚合基因型与羊毛性状关联分析在中国美利奴羊(新疆型)群体中,对羊毛性状与相关候选基因进行聚合效应分析,发现KAP6.1与KRTAP9-2基因型组合BBBB型长度评分个体,ABAA型与ABAB型毛油汗评分和毛光泽评分个体,AABB、BBBB和AAAB型剪毛量个体和ABBB型弯曲数个体之间差异显著(P<0.05);KAP8.1与KAP8.2基因型组合AACC型与ABCC型鉴定时体重个体,ABAA、AABB、BBBB、BBAB、BBCC型弯曲评分个体,BBAA、ABAA、ABBB与ABAB型毛细度评分个体,AACC型体格大小个体,BBBB型剪毛量个体差异显著(P<0.05);KAP16.4-1与KAP16.4-2基因型组合聚合基因型AAAB型鉴定时体重个体,ABAA和ABCC型毛弯曲评分个体,ABAB型毛细度评分、毛油汗评分、毛光泽评分和弯曲数个体,ABCC型变异系数个体差异显著(P<0.05)。而其它聚合基因型个体对羊毛性状的遗传作用率较小。