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本研究运用了RNA干扰技术对eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞中的FGF5基因进行了干扰。首先针对小鼠FGF5 mRNA的第316～335bp区域、第499～518bp区域和第766～785bp区域分别设计了发夹式RNA干扰片段,经合成和退火后,连接到pSilencer 3.0-H1载体上,再把H1和干扰片段一同酶切下来,并将带有H1启动子的干扰片段连接到红色荧光表达载体pCDsR上,分别命名为pCDsR-shRNA316(VⅠ)、pCDsR-shRNA499(VⅡ)、pCDsR-shRNA766(VⅢ)。同时对eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞进行原代培养,并将干扰载体以脂质体介导法转染细胞,收集转染后的细胞提取总RNA,并反转录成cDNA。用SYBR GREEN I荧光定量PCR方法对转染了不同干扰载体的细胞cDNA进行检测,结果为:VI干扰载体转染到细胞后,FGF5的表达量降低6.7倍；VⅡ干扰载体转染到细胞后,FGF5的表达量降低12.5倍；VⅢ干扰载体转染到细胞后,对FGF5的表达没有显著的影响。结论是小鼠FGF5 mRNA中,第766～785bp区域不是有效干扰区域：第316～335bp区域和第499～518bp区域是有效干扰区域,其中第499～518bp区域是最合适的干扰区域。本实验结果为今后针对其他因子的RNAi干扰和基因功能研究提供了研究基础,并为建立转基因干扰小鼠模型创造了条件。