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本试验采用黄瓜花药培养和辐射花粉授粉两种方法建立单倍体再生体系。所得结果如下:
1.在黄瓜花药培养中,其小孢子发育时期、培养基、培养条件及基因型都对花药培养有极显著的影响。小孢子单核中后期为花药培养最佳时期, 与花蕾外部形态对应关系为:花蕾长度在0.90-1.50cm,花冠绿色,瓣尖未张开,花药颜色为白绿色或淡绿色。基因型不同,小孢子在单核中后期对应的花蕾长度以及颜色略有差异。B5 培养基的效果明显好于MS培养基。最佳低温预处理条件为黑暗,4℃,48~72h。一般早春播种的材料比秋季的材料培养效果好。
2.在辐射花粉授粉诱导黄瓜单倍体时,正反交组合、辐射剂量、转接日期等都对植株再生率,单倍体再生率有极显著的影响。花粉的活力和萌发率在辐射过的花粉和未经过辐射的花粉差异在于:作为对照的花粉(未辐射的)萌发率大于经过辐射的花粉。随着辐射剂量的增大,花粉萌发率下降;而花粉的萌发率和花粉的活力之间没有相关关系:花粉的活力并没有象萌发率一样随辐射剂量增加而降低。
3.对再生植株鉴定时发现:单倍体植株的长势,明显弱于二倍体。而单倍体的保卫细胞叶绿体平均数目(4个)要明显低于二倍体(10个)。SSR结果显示:二倍体再生植株中混杂二倍体(含有S52的DNA)有6株,占30 %。