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肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是骨骼肌生长的负调控因子,特异性的抑制骨骼肌细胞的增殖和分化,对骨骼肌和脂肪的生长发育起着重要作用。MSTN缺失可提高骨骼肌内快肌(Ⅱ型)纤维的形成。MyoD和MEF2C是肌纤维分化关键基因,研究表明MyoD的表达量在Ⅱ型肌纤维中较高,而MEF2C则在Ⅰ型慢肌纤维中表达量高。因此检测MSTN基因的缺失对新生仔猪的骨骼肌发育的作用,阐明MyoD和MEF2C对MSTN基因敲除猪骨骼肌纤维类型分化的影响。MSTN的缺失会抑制皮下脂肪的发育,主要表现为脂肪层变薄及脂肪细胞变小。但是MSTN缺失对肌内脂肪的研究还很少,因此我们用MSTN基因敲除猪的骨骼肌细胞进行成脂诱导分化,通过检测脂肪分化能力及脂肪相关因子的检测,确定MSTN缺失对成脂分化的影响。为了减少环境及饮食等因素对试验结果的影响,选新生仔猪为试验动物。对新生的MSTN基因双侧敲除猪、MSTN基因单侧敲除猪及野生型猪进行取材,选取股二头肌、半腱肌和膈肌。通过苏木素伊红染色和ATP酶染色进行组织形态学检测,观察骨骼肌纤维类型的差异。结果表明,MSTN基因敲除猪与野生型猪相比,其骨骼肌纤维横截面积增大,且差异显著(p<0.05),并快肌的含量增加,而慢肌的含量减少。实时定量PCR检测肌肉及脂肪相关因子的mRNA表达量的差异。实时定量PCR结果显示,MSTN基因敲除猪与野生型猪相比MyoD的mRNA表达量提高,MEF2C的表达量降低。骨骼肌细胞脂肪诱导分化结果显示,MSTN基因敲除细胞的脂肪分化能力更强。且MSTN基因敲除细胞内的脂肪发育相关因子的表达量都提高了,其中PPARγ的表达量提高了 1.8倍(p<0.05),FABP4的表达量提高了 2.5倍(p<0.001)。因此可得出结论,MSTN基因敲除对新生仔猪的骨骼肌发育、肌纤维类型分化及肌内脂肪的发育起着重要作用。