Mir-29a对胶质母细胞瘤LN229及u251细胞株生长及侵袭性的影响研究

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:ganglei2008
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MicroRNAs是一组内源性、非编码蛋白质的单链RNA,大小为21~24个核苷酸。在转录后水平调节基因的表达。microRNA-29a(miR-29a)为miR-29家族成员之一,在脑胶质母细胞瘤(GBM)预后最差的Astrocytic和Neural两个亚组中表达量明显升高,且与患者临床预后呈负相关关系。生物信息分析示PTEN、EphB3、SOX4基因有可能为miR-29a作用的靶基因。本研究目的研究1niR-29a对GBM LN229、U251细胞株生长及侵袭的影响。方法:本研究首先构建稳定高表达miR-29a的GBM细胞株;应用BrdU、 MTT及肿瘤生长动物实验技术检测miR-29a对GBM细胞株的生长影响;应用Transwell侵袭实验检测miR-29a对GBM细胞侵袭的影响;应用Western Blot技术检测miR-29a的预测目标基因PTEN、EphB3、AKT、SOX4在过表达miR-29a的GBM细胞株中的表达;应用Real-time PCR技术检测高表达miR-29a GBM细胞中SOX4基因的表达水平;应用荧光素酶报告检测经miR-29a模拟物处理后荧光素酶-SOX4-3’UTR融合蛋白在293FT细胞中的表达。结果:1、miR-29a促进GBM细胞生长。2、miR-29a促进GBM细胞侵袭。3、miR-29a通过下调PTEN基因表达,激活AKT促进PTEN野生型的GBM细胞生长。4、PTEN突变的GBM细胞,miR-29a通过下调EphB3,激活AKT。5、miR-29a下调SOX4基因表达,促进GBM细胞侵袭。结论:miR-29a通过多个信号传导通路调控GBM细胞的生长和侵袭。
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