甲基丙烯酸酐化明胶/明胶微球水凝胶支架生物相容性的评价

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骨骼是一种高度血管化的组织,由于临床干预,疾病,突发事故等导致的骨缺损一直影响着人类生活质量。目前,临床上自体骨移植和同种异体骨移植这两种方法是治疗骨缺损的“金标准”。但是供区并发症以及疾病传播等风险使得这种“金标准”修复方法受到了一定的限制。近年来,骨组织工程得到了很好的发展。骨组织工程包括三大要素:生成骨组织的种子细胞,一些生长因子以及适合的骨组织工程支架。当前,合成支架的材料主要集中于一些天然衍生材料和合成的材料。其中天然材料明胶在骨组织工程应用比较广泛。目的:明胶(Gelatin)被广泛应用于组织工程。但是,其固有的亚微米,或纳米结构严重制约了细胞的增殖和组织形成。为了解决这一问题,本研究基于明胶微球(gelatin microspheres,GMs)制备了甲基丙烯酸酐化明胶/明胶微球(GelMA-based gelatin microspheres hydrogel,GelMA-GMs)水凝胶支架,并检测其生物相容性。方法:制备GelMA-GMs水凝胶支架。采用MTT法,溶血试验,活/死细胞染色,DAPI染色检测该支架与SD大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的生物相容性。倒置相差显微镜下观察明教微球内部结构。PCR评价BMSCs在支架中成骨的效果。结果:制备好的GelMA-GMs水凝胶支架,外观上呈乳白色。倒置显微镜观察BMSCs在支架浸提液中生长良好。MTT检测结果说明浸提液组和对照组的吸光度值无明显差异(P>0.05),GelMA-GMs水凝胶支架细胞毒性等级为一级。溶血试验示GelMA-GMs水凝胶支架浸提液溶血率为1.23%(<5%)。活/死细胞染色以及DAPI染色表明BMSCs在支架上增殖良好。倒置相差显微镜观察示GMs呈多空隙结构,微球直径约200um。PCR结果示封装在GelMA-GMs水凝胶支架的BMSCs在成骨诱导液的诱导下呈现良好的成骨分化。结论:GelMA-GMs水凝胶支架具有良好的生物相容性,有望作为新型的骨组织工程材料。
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