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生物表面活性剂与化学表面活性剂相比,具有可生物降解的特点,且无毒副作用,被用于石油开采领域。糖脂作为一种重要的生物表面活性剂,有较强的乳化原油功能。因此有望替代化学表面活性剂走进原油开采市场,创造更大的经济价值。本文从大庆油田油藏产出水样中筛选出一株糖脂类表面活性剂产生菌株。通过对样品中的微生物进行富集、平板三区划线分离、血平板筛选、乳化原油效果检测、表面活性剂种类测定等方法,最终得到一株糖脂类表面活性剂产生菌QS-M2。经形态观察及生理生化实验,结合16S r DNA全序列分析,鉴定菌QS-M2为铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa。对发酵条件进行了初步优化,最终确定发酵培养基条件为:碳源为豆油5%,氮源为硝酸铵0.6%,发酵时间为120 h。得到糖脂类表面活性剂产量为0.802 g/L,与优化前相比产量增加了2.56倍。采用酸沉淀与有机溶剂萃取结合的方法对糖脂进行提取,硅胶柱层析和葡聚糖凝胶柱层析的方法纯化糖脂,薄层层析法和苯酚浓硫酸法对纯化后的糖脂进行鉴定。采用HPLC-MS对糖脂进行结构分析,并对其理化性质进行了探究。实验结果表明,菌株QS-M2所产糖脂类表面活性剂包括单鼠李糖脂和双鼠李糖脂。单鼠李糖脂的六种主要成分为RhaC10C10、RhaC12C12、RhaC10C12、RhaC12、RhaC14、RhaC8C10。其中,RhaC10C10、RhaC12C12两种组分含量较多,为主要产物。含有两分子碳链长度为8-12的β-羟基脂肪酸的单鼠李糖脂含量高于含有一分子碳链的单鼠李糖脂。双鼠李糖脂的三种成分为Rha2C14C12、Rha2C10C12、Rha2C10C10。三种成分的含量随着β-羟基脂肪酸部分的碳链长度减少而降低。与已有文献相比,本实验检测的双鼠李糖脂混合物碳链长度普遍较长。对鼠李糖脂进行界面张力、乳化性能和排油性能测定。鼠李糖脂降低界面张力的能力随着浓度的增大逐渐稳定,最终降低界面张力72.0 m N/m至36.9 m N/m,下降了35.1 m N/m。排油圈直径随着表面活性剂的浓度增大而增加,排油性能增强。鼠李糖脂的乳化性能较好,在1.5 g/m L浓度下乳化效果达到最高,72 h内性质稳定。