紫花牡荆素对肝癌HepG2细胞凋亡和分化的影响

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目的:观察紫花牡荆素(Casticin, CAS)抑制人肝癌Hep G2细胞生长、诱导细胞凋亡和分化作用。评价CAS作为新型肝癌治疗药物的潜在价值。方法:用不同浓度的CAS处理Hep G2细胞,分别应用MTT比色法、平皿集落形成法、DNA琼脂糖凝胶电泳检测CAS对Hep G2细胞生长和凋亡的影响。碘化丙啶(PI)流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)检测细胞周期和细胞凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测CAS对Hep G2细胞casepase-3活性的影响;瑞氏-姬姆萨染色显微镜测量细胞核质比。放射免疫法检测细胞液甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein, AFP);酶促反应试剂盒检测细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)和γ-谷胺酰转肽酶(γ-glutamyltrans peptidase,γ-GT)的活性;Diamond stone分光光度法测定细胞酪氨酸-α-酮戊二酸转氨酶(tyrosine-α-Ketoglutaric acid transaminase, TAT)的活性结果:不同浓度的CAS作用于Hep G2细胞后,Hep G2细胞生长受抑制,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01); Hep G2细胞经10mg/LCAS作用后,G0/G1期细胞百分率下降(P<0.01),S期和G2/M期细胞百分率上升(P<0.01),G2/M期细胞百分率上升的显著(P<0.01), Sub-G1期细胞百分率亦显著上升(P<0.01);CAS干预组Hep G2细胞的DNA明显降解,可见细胞凋亡特征性梯状DNA条带;CAS干预组Hep G2细胞caspase-3活性明显升高,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);CAS干预组Hep G2细胞核质比下降;细胞AFP的分泌和γ-GT的活性显著降低(P<0.01);ALP和TAT的活性则显著升高(P<0.01)。结论:1、CAS具有抑制体外培养人肝癌Hep G2细胞生长作用。2、CAS具有诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡的作用。3、CAS具有诱导人肝癌Hep G2细胞分化的作用。4、CAS抑制人肝癌Hep G2细胞生长和诱导凋亡作用机理与细胞周期G2/M期阻滞和caspase-3活化有关。
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