被动吸烟所致小鼠肺癌中Ang-3基因表达及其意义的初步探讨

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研究目的:通过小鼠全基因组表达芯片筛选被动吸烟所致小鼠肺癌相关基因,并利用实时荧光定量PCR对筛选的高表达基因进行验证与确证,再利用western blot检测小鼠肺癌组织中Ang-3蛋白的表达量,初步寻找新的与肺癌相关的基因,为全面揭开肺癌发病机制、进一步诊断和治疗肺癌提供依据。研究方法:1.通过基因表达芯片筛选被动吸烟致小鼠肺癌中异常表达的基因;2.荧光实时定量PCR验证部分基因芯片结果;3.应用western blot分析方法检测小鼠肺组织中Ang-3基因的蛋白表达量变化。结果与结论:1.通过小鼠全基因组表达谱芯片检测,得到上调基因621条(其中包括未知功能基因293条),主要包括癌基因、信号转导及通路、细胞周期调节、细胞粘附、免疫及炎性反应、细胞分化等功能基因。2.根据基因芯片的筛查结果,挑选在肿瘤组高表达的基因,并在NCBI上查寻相关资料,通过分析,从中挑选出5个目前未发现有癌基因或抑癌基因功能的基因,应用实时荧光定量PCR分析它们在小鼠不同肺组织中]mRNA的差异表达,结果显示4个基因Ang-3、Arg-2、H2-Ea和H2-D1在肺癌组织中表达明显高于正常肺组织(p<0.05);Ifi203基因在肺癌组织和对照正常肺组织中的mRNA表达量无明显变化(p>0.05)。最后,重点选择Ang-3基因进一步做Western blot分析。3. Western blot分析结果显示基因Ang-3蛋白表达量在小鼠肺癌组织中高于正常肺组织,比较有显著性差异(p<0.05)。这与全基因组表达谱芯片检测结果和实时荧光定量PCR结果相一致。4.由上可看,Ang-3基因在被动吸烟所致小鼠肺癌的发生、发展中发挥一定的作用。
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