黑色素瘤相关抗原Restin和转录因子ATF3相互作用效应的研究

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:yuyadong119
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Restin是1999年本校生物化学与分子生物学教研室在研究全反式维甲酸诱导细胞分化时克隆得到的一个未知功能的人类新基因,2001年,Chomez等通过同源序列筛选Genebank数据库,也发现了该基因,并命名为MAGE-H1,该基因主要表达于终末分化细胞。稳定转染该基因的细胞出现G1期阻滞,抑制细胞的增殖,提示Restin与细细胞周期的调控有关。但有关该基因的具体生物学功能研究还未见报道。 实验前期研究利用细胞双杂交技术,对Restin在细胞周期中可能的作用的转录因子(ATF3、ATF4、E2F6、C-JUN、C-FOS、p53)进行了双杂交筛选,结果发现ATF3与Restin表现出很强的相互作用。为了进一步验证ATF3与Restin的相互作用,对ATF3进行截短并构建了一系列ATF3的截短片段的双杂交质粒,再次运用细胞双杂交进行相互作用的探索。结果发现Restin与ATF3的确存在相互作用,并作用于ATF3的DNA结合结构域(ATF3 binding domain,ATF3/BD),不完整的ATF3/BD降低了Restin与ATF3相互作用能
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