马巴贝斯虫是一种血液寄生虫，马属动物感染该寄生虫后，可引起一种血液原虫病，通常把它叫作马巴贝斯虫病。由于马巴贝斯虫危害大，难以根治，对国际马匹贸易产生很大影响，因此各国都将该病列为重要监测的马病之一。敏感、特异的血清学检测方法一直是各国学者研究的主要对象。 本研究采用人工合成马巴贝斯虫Be82A基因，然后再通过PCR扩增、酶切、连接方法构建了2个Be82基因片段和1个完整的Be82基因重组表达载体，并成功在融合表达载体pGEX-4T-11中进行了表达。经PCR鉴定，3个重组表达的Be82基因片段的大小分别为192bp、306bp和420bp，与预期的结果相符。经SDS-PAGE电泳，结果表明3个目的基因表达蛋白的大小分别为33KD、37KD和42KD。 经ELISA检测，3种融合表达的蛋白均能与马巴贝斯虫阳性血清发生特异性反应，说明这3种表达蛋白都具有作为诊断用抗原的可能性。分别以这3种抗原为基础，建立ELISA方法，在小样品范围内进行测试，结果表明33KD蛋白的敏感性要高于37KD和42KD，从而确定选择33KD表达蛋白作为诊断用抗原来检测马巴贝斯虫病EUSA。 用本研究建立的ELISA试剂对出口马匹进行检测，与传统检测方法补体结合试验进行比对，结果表明两种方法的符合率为100％。说明本研究建立的ELISA具备替代补体结合试验的基础。 综上所述，本研究成功构建表达了Be82基因片段，并在国内首次筛选出敏感、特异的马巴贝斯虫病诊断用抗原。利用该抗原制备的ELISA可检测出马巴贝斯虫阳性动物，为我国进出口马属动物的检验提供了技术手段，解决了目前我国马巴贝斯虫病检测试剂依赖进口的局面，为我国自主生产马巴贝斯虫病检测试剂提供了可能性，该技术可广泛应用于马巴贝斯虫病的诊断、检疫、控制和净化，为我国马巴贝斯虫病的监测和流行情况的调查提供了技术支持。