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目的:研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与同源树突状细胞(DC)共培养后CIK细胞的表型、增殖活性的变化,及其对肿瘤细胞细胞毒作用的影响。方法:采集健康供者的外周血单个核细胞(PBMC)悬液,用Ficoll分离出单个核细胞,置于37℃,5%CO2培养箱培养2小时,收集非贴壁细胞用于诱导培养CIK细胞,贴壁细胞经多种细胞因子组合诱导分化出成熟DC,收获成熟的DC,光镜下观察细胞形态、计数,流式细胞仪检测细胞表型,透射电镜观察细胞结构;将成熟DC和CIK细胞按1:5的比例混合培养3天,用MTT法检测DC-CIK共培养细胞杀伤K562及其耐药细胞株和SMMC-7721肝癌细胞株的活性。结果: ①DC 形态发生明显变化,细胞培养2~3天后细胞出现拉长呈细树枝状等多种不规则形态,随着培养时间延长,拉长的伪足逐渐回缩成细毛刺状突起,成熟DC光镜下观察细胞表面呈树枝状或毛刺状突起,细胞形态不规则;②成熟DC超微结构观察DC细胞表面有大量粗细不等的树枝状突起,胞体大,胞核不规则形,核内异染色质明显边集;③CIK在第3天始出现增殖,第5天后进入快速增殖期。培养第14天,细胞可扩增13.6~20.3倍;培养至第21天时,CIK细胞可扩增至52.67.~64.81倍;④DC与CIK细胞共培养后,增殖速度明显快于单纯CIK细胞组,CIK和DC-CIK对K562、K562/ADM及SMMC-7721均有较强的杀伤作用,这种杀伤作用随效靶比的增高而增强。CIK对K562敏感株和耐药株杀伤率的差异无统计学意义,DC-CIK对K562敏感株和耐药株的杀伤作用亦无明显差异; DC-CIK共培养物对K562、K562/ADM和SMMC-7721的杀伤活性均高于单纯CIK细胞组,且差异显著(p<0.05)。结论:DC与CIK共培养细胞是一种增殖活性和细胞毒活性高于CIK细胞的免疫活性细胞,DC-CIK对K562、K562/ADM和SMMC-7721的杀伤活性均明显高于单纯CIK细胞。