外源性一氧化碳释放分子(CORM-2)对脓毒症早期小肠炎症反应的抑制作用及分子机制

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背景与目的脓毒症(Spesis)是指由感染引起的全身性炎症反应综合征(SystemicInflammatory Response Syndrome,SIRS),证实有细菌存在或有高度可疑感染灶,是当前创伤、烧伤外科以及ICU所面临的棘手难题,其进一步发展所导致的脓毒性休克(septic shock,SS)、急性呼吸窘迫综合征(acute respiratorydistress syndrome,ARDS)以及多脏器功能不全综合症(multiple organdysfunction syndrome,MODS),已成为脓毒症患者死亡的主要原因。尽管现代外科监护技术和抗生素治疗有了很大进展,但脓毒症的死亡率仍然居高不下,因此,脓毒症及其并发症尤其是MODS的防治,仍然是当代外科学领域的难题之一。而肠道作为机体的一个重要器官,在Spesis本研究利用外源性一氧化碳释放分子(CORM-2)作为外源性CO的来源,通过离体和在体实验来研究外源性CO对脓毒症早期小肠的炎症反应是否具有抑制作用,并探讨其作用机制。方法研究分为2部分,第一部分,利用CLP小鼠血清刺激Caco-2细胞,建立细胞刺激模型(In Vitro),研究炎症反应的机制以及外源性一氧化碳释放分子(CORM-2)所释放的CO对该模型的干预作用;第二部分,应用盲肠结扎穿孔(CLP)的C57BL/6小鼠作为脓毒症模型(In Vivo),小鼠随机分为4组(具体例数根据检测指标而定):假手术组、CLP组、CLP+iCORM组、CLP+CORM-2组,以小肠的形态学、功能以及炎性细胞为指标探讨CLP小鼠早期小肠炎症反应的部分分子机制,评价外源性一氧化碳释放分子(CORM-2)所释放的CO对CLP小鼠早期小肠炎症反应的抑制作用。结果及结论1.Caco-2刺激模型:损伤后IL-8、NO水平明显提高。外源性CO干预组炎症的反应较对照组明显减轻,说明外源性CO能在一定程度抑制作为Caco-2刺激模型的炎症反应及其氧化损伤。2.CLP小鼠模型:术后24h小鼠小肠炎细胞浸润明显,干湿比降低,蠕动功能降低,血浆中IL-1β、IL-6、TNF-α等指标明显上升,ICAM-1、NF-κB、iNOS蛋白表达以及NO,MDA,MPAS水平明显增加。而外源性CO的直接干预可以明显改善小肠组织肿胀程度,提高蠕动功能,抑制上述各炎症因子水平及蛋白表达,有效维护细胞功能。以上结果表明,使用脓毒症细胞以及动物模型,证实了外源性一氧化碳的干预在一定程度上抑制了脓毒症早期小肠炎症反应的发展。
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