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水体的富营养化已经成为日趋严重世界性问题,氮和磷是引起水体富营养化的主要因素。生物脱氮除磷技术因此受到了越来越广泛的关注。反硝化除磷菌(Denitrifying Phosphorus Removing Bacteria, DPB)是一类同时完成反硝化和聚磷的微生物,在厌氧条件下,DPB可以利用有机物合成聚-β-羟基丁酸(PHB)并储存在细胞内,释放正磷酸盐；在缺氧条件下,它可以PHB为碳源,以NOx为电子受体进行反硝化,同时超量聚磷。目前已鉴定的反硝化除磷细菌有寡营养单胞菌属(Stenotrophomonas sp.)、不动杆菌属(Acinetobacter sp.)、假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、莫拉氏菌属(Moraxellasp.)、气单胞菌属(Aeromonas sp.)和肠杆菌属(Enterobacter sp.)。为了鉴定颗粒污泥中的反硝化除磷优势菌种,本研究首先对污泥颗粒中所含菌种进行DGGE分析；然后通过纯化培养,缺陷筛选具有反硝化除磷功能的菌种；在此基础上对获得的菌种进行细胞学、生理生化和分子生物学鉴定。结果如下：颗粒污泥中细菌种群分析。从污泥中提取DNA,采用DGGE技术和测序方法分析细菌种群结构。结果显示,在获得的12个种群中,共有1个索氏菌属(Thauera sp.)、3个发硫菌属(Thiothrix sp.)、2个不动杆菌属(Acinetobacter sp.)和6个不可培养细菌菌种。在这些种群中,只有不动杆菌属(Acinetobacter sp.)具有一定的反硝化除磷功能,因此推测不动杆菌为优势菌种。优势细菌种群的分离与鉴定。通过在牛肉膏蛋白胨培养基进行平板涂布培养,经纯化培养得到菌落形态、生长时间各不相同的24个菌株,将得到的分离菌株在三种缺陷筛选培养基上进行依次筛选,三种培养基分别是反硝化筛选培养基,缺磷缺陷培养基,富磷缺陷培养基。最终共得到两株菌株,分别是DPB-F2和DPB-F5。对这两个菌株进行16S rDNA序列的PCR扩增及测序,结果显示这两株菌株为同属Acinetobacter sp.。生理生化分析进一步证明它们为琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii)。