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目的基于体外细胞层面,探讨Zfp326在PQ致神经细胞损害中对NR030777/Cpne5表达变化中的作用以及Zfp326/NR030777/Cpne5三者在百草枯致神经细胞损害中的作用机制方法（1）使用si-Zfp326转染N2a、MN9D后,以0、100、300μM PQ分别处理N2a、MN9D细胞24、36 h,q RT-PCR、WB检测Zfp326、NR030777、Cpne5基因m RNA及ZFP326、CPNE5蛋白表达水平变化（n=3）;（2）以放线菌素D（Actinomycin D,Act D）处理si-Zfp326转染后的N2a细胞,q RT-PCR检测不同时间点NR030777与Cpne5 m RNA含量,回归分析其稳定性（n=3）;（3）以si-Zfp326转染N2a、MN9D细胞,24 h后以0、100、300μM PQ处理N2a细胞24、36 h,CCK-8检测细胞增殖（n=6）;（4）以si-Zfp326转染N2a细胞,24 h后以0、100、300μM PQ处理N2a细胞24 h,流式细胞术检测细胞凋亡;WB检测SEPTIN2、DBC-1蛋白表达水平变化（n=3）;（5）使用TRAP技术下拉NR030777,采用MS、NGS检测与NR030777结合的蛋白质（RBPs）和RNA;应用GO、Pathway分析与NR030777结合的分子;（6）以si-Zfp326转染N2a细胞,24 h后以0、100、300μM PQ处理N2a细胞36 h,WB检测SF3B3蛋白表达水平变化（n=3）;（7）以si-Sf3b3转染N2a细胞,24 h后以0、100、300μM PQ处理N2a细胞24 h,q RT-PCR检测Sf3b3、NR030777 m RNA表达水平变化（n=3）。结果（1）转染si-Zfp326,Zfp326基因m RNA及蛋白表达下调（P<0.01）;NR030777表达下调（P<0.01）;Cpne5基因m RNA及蛋白表达无变化。（2）转染si-Zfp326,NR030777稳定性下降,降解速率加快;Cpne5 m RNA稳定性无变化。（3）PQ抑制N2a、MN9D增殖,并存在剂量反应关系;转染si-Zfp326,细胞增殖活性升高（P<0.01）。（4）PQ促进N2a凋亡,并存在剂量反应关系;转染si-Zfp326,细胞凋亡下降（P<0.01）;SEPTIN2、DBC-1蛋白表达无明显变化。（5）与NR030777结合的蛋白质和RNA广泛参与细胞的各种生命活动,其中主要参与亨廷顿病、帕金森病等神经退行性疾病以及细胞的氧化应激过程。（6）PQ促进SF3B3蛋白表达升高;转染si-Zfp326,SF3B3蛋白表达下调（P<0.05）。（7）转染si-Sf3b3,Sf3b3 m RNA表达下调（P<0.01）;NR030777表达下调（P<0.01）。结论根据以上结果,可得出以下结论（1）在PQ致神经细胞损害中,敲低Zfp326通过下调m RNA前体剪接因子SF3B3的表达以及降低NR030777稳定性来调控NR030777表达。（2）在PQ致神经细胞损害中,敲低Zfp326可逆转PQ引起的神经细胞增殖活力下降以及降低神经细胞凋亡的比例。（3）与NR030777结合的蛋白质和RNA主要参与亨廷顿病、帕金森病等神经退行性疾病以及细胞的氧化应激过程,NR030777在PQ致神经细胞损害中至关重要。