半胱氨酰白三烯受体拮抗剂调节神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化

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目的:观察半胱氨酰白三烯受体激动剂LTD4以及受体1(CysLT1)拮抗剂普鲁司特和孟鲁司特对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞分化的影响。方法:以维甲酸为阳性对照,观察LTD4、普鲁司特、孟鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞形态学变化;用免疫印迹法观察SK-N-SH细胞CysLT1和CysLT2受体的表达;用免疫荧光法观察神经元分化标记物微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达。结果:(1)免疫印迹显示,SK-N-SH表达CysLT1受体和CysLT2受体,CysLT2受体表达较多。(2)半胱氨酰白三烯受体激动剂LTD4(10-12~10-8mol/L)对SK-N-SH细胞分化没有明显作用。(3)维甲酸、普鲁司特能够时间和浓度依赖性诱导SK-N-SH细胞分化,普鲁司特(10-7、10-6和10-5 mol/L)处理后,细胞形态发生变化,伸出树(轴)突样突起;在分化的第五天胞体变小,突起增长,有些甚至相互连接成网,以10-5mol/L的普鲁司特对细胞的形态学改变更加明显,孟鲁司特(10-8~10-5mol/L)的分化作用比普鲁司特作用更强,在第一天就有明显的分化作用。(4)LTD4(10-8mol/L)+普鲁司特(10-8~10-5mol/L)也能够促进SK-N-SH细胞分化,而且比单用普鲁司特作用更强,合用普鲁司特10-5mol/L 1d后就有显著促进作用,5d后10-8 mol/L也有显著作用。(5)免疫荧光结果显示,普鲁司特(10-7~10-5 mol/L)增加SK-N-SH细胞表达MAP-2,增加的MAP-2主要表达在胞体,而阳性对照维甲酸可诱导突起表达MAP-2。结论:CysLT1受体激动剂对SK-N-SH细胞的形态学变化没有影响,而拮抗剂普鲁司特、孟鲁司特参与SK-N-SH细胞分化的调节。
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