右美托咪定预处理对脓毒血症大鼠海马区Nogo-A表达及认知功能的影响

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目的:脓毒血症是由于各种微生物或毒素存在于人体内环境所引发的一种全身炎症反应(Systemic Inflammatory Response Syndrome SIRS)。在过去的十几年间,脓毒血症的发病率大幅增加,由于医疗水平的改进,病死率大大降低,但治愈患者的认知障碍的发病率明显增加。临床研究表明脓毒血症患者,住院期内认知障碍发生率高达60%,包括学习、记忆、联想、方面的改变。认知功能障碍严重影响患者的生存质量,因此对脓毒血症引起认知功能障碍的研究具有重要意义。研究表明:海马组织神经元坏死和凋亡可能是导致神经功能缺损,学习记忆能力障碍的主要原因。而神经损伤后,神经再生困难一直是难以解决的问题,目前来看,再生困难主要与中枢神经系统微环境内抑制性因素相关,包括Nogo蛋白、髓磷脂相关糖蛋白(myelin-associated glycoprotein,MAG)、少突胶质细胞髓磷脂糖蛋白(oligodendrocyte myelin glycoprotein,OMGP),三者均可和Nogo受体(nogo receptor,NgR)结合,抑制成熟神经元轴突再生,诱导细胞生长锥塌陷,从而达到抑制神经系统损伤修复的作用。其中以Nogo蛋白的抑制作用最为明显,而NgR可能是各种轴突生长抑制性蛋白的共同作用点。因此,本实验通过腹腔注射脂多糖建立脓毒血症大鼠模型来观察其行为学方式的改变,验证神经系统微环境内抑制轴突再生的相关指标的变化,为寻找预防或治疗脓毒血症的方法奠定实验研究的基础。研究方法:健康清洁SD雄性大鼠24只,体重200-250g,采用随机数字表法将其分为4组(n=6):对照组(C组),脓毒血症组(L组),右美托咪定+脓毒血症组(D+L组),单纯右美托咪定组(D组)。C组不做任何处理;D+L组腹腔注射DEX50μg/kg,15min后尾静脉注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)5mg/kg;L组腹腔注射等容量(1ml)生理盐水,15min后尾静脉注射LPS5mg/kg;D组腹腔注射DEX 50μg/kg,15min后尾静脉注射等容量(1ml)生理盐水。各组于给药后24h,用Morris迷宫测试大鼠认知功能的变化,其后处死大鼠,取大鼠海马组织,免疫组织化学及Western blot法检测Nogo-A蛋白的表达。结果:1、与C及D组相比,L及D+L组逃避潜伏期和游泳总距离延长,穿越平台次数减少(p<0.05);与L组比较,D+L组逃避潜伏期和游泳总距离缩短,穿越平台次数增加(p<0.05)。2、与C及D组相比,L及D+L组海马组织中Nogo-A表达上调(p<0.05);与L组比较,D+L组Nogo-A表达下调,IOD值明显降低(p<0.05)。结论:本实验4组大鼠认知功能发生了改变,说明腹腔注射脂多糖可以成功建造脓毒血症大鼠模型。右美托咪定可改善脓毒素血症大鼠的认知功能,其机制可能与抑制海马组织中Nogo-A表达有关。
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