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背景:NLRP3(NLR family Pyrin domain-containing 3)炎性小体在脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)损伤的炎症反应过程中起着至关重要的作用,但其上游调控机制不清。蛋白酪氨酸磷酸酶,非受体型22(protein tyrosine phosphatase,nonreceptor type 22,PTPN22)参与细胞免疫反应及炎症,与多种自身免疫性疾病有关。研究表明PTPN22可以通过去磷酸化NLRP3的Tyr861激活NLRP3炎性小体。组蛋白去乙酰化酶10(Histone deacetylase 10,HDAC10)是最新发现的II类组蛋白脱乙酰酶,参与免疫反应。研究表明HDAC10可以直接结合PTPN22启动子,对PTPN22起转录抑制作用,从而抑制PTPN22的表达。然而,HDAC10是否影响脑出血后的炎症反应尚不清楚。目的:探讨HDAC10是否通过蛋白酪氨酸磷酸酶,非受体型22(protein tyrosine phosphatase,nonreceptor type 22,PTPN22)抑制NLRP3炎性小体激活从而减轻脑出血后炎性损伤。方法:(1)运用将自体血注入基底节的方法建立大鼠脑出血模型。Western blot检测大鼠脑出血后3h,6h,12h,24h,48h HDAC10的表达情况。(2)化学合成HDAC10 siRNA和PTPN22 siRNA,Western blot检测干扰效果,并筛选干扰效果最好的HDAC10 siRNA和PTPN22 siRNA。(3)改良的神经功能评分(mNSS)评价sham组、ICH组、ICH+NC组、ICH+HDAC10 siRNA组大鼠的神经功能;干湿重法测量各组大鼠的脑含水量;伊文思蓝(Evans blue,EB)检测各组大鼠血脑屏障通透性;HE染色和尼氏染色检测大鼠脑组织形态学变化;免疫荧光法检测各组大鼠脑组织血肿周围髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的表达;(4)Western blot检测sham组、ICH组、ICH+NC组、ICH+HDAC10siRNA组大鼠脑组织HDAC10、NLRP3、cleaved-caspase-1、cleaved-IL-1β和cleaved-IL-18的表达;ELISA检测IL-1β和IL-18的表达。(5)Western blot检测sham组、ICH组、ICH+NC组、ICH+HDAC10 siRNA组、ICH+PTPN22 siRNA组、ICH+HDAC10 siRNA+PTPN22 siRNA组大鼠脑组织HDAC10、PTPN22、NLRP3、cleaved-caspase-1、cleavedIL-1β和cleaved-IL-18的表达。Co-IP检测PTPN22和NLRP3的结合情况。结果:(1)脑出血后大鼠脑组织中HDAC10的表达增高,在24h达到高峰。(2)筛选出对HDAC10干扰效果最好的siRNA(正义链:GCUGGAUUCGACUCUGCUATT;反义链:UAGCAGAGUCGAAUCCAGCTT),对PTPN22干扰效果最好的siRNA(正义链:GCAUGUAUGGAGUUCGAAATT;反义链:UUUCGAACUCCAUACAUGCTT)。(3)干扰HDAC10增加了脑出血后大鼠神经功能评分、脑含水量和EB含量,加重了脑组织损伤。(4)干扰HDAC10增加了脑出血后大鼠脑组织中NLRP3、cleaved-caspase-1、cleaved-IL-1β和cleaved-IL-18的表达。(5)干扰HDAC10增加了PTPN22的表达,从而促进了NLRP3炎性小体的激活,进而加重脑出血后炎性损伤;而使用PTPN22 siRNA有效地逆转了这一作用。此外,干扰HDAC10还促进了PTPN22与NLRP3结合。结论:干扰HDAC10可以加重大鼠脑出血损伤,其机制可能是通过PTPN22诱导NLRP3炎症小体的活化从而加重了脑出血损伤。