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目的研究甲状旁腺激素（Parathyroid Hormone (1-34)，PTH (1-34)）对雌性DH豚鼠原发性骨关节炎（OA）关节软骨和软骨下骨的作用，并探讨PTH (1-34)对白介素-1β（Interleukin-1β, IL-1β）诱导的体外分离培养的DH豚鼠软骨细胞炎性反应的影响。方法136只1月龄雌性DH豚鼠随机分成两组：对照组24只，分别于1，3，6和9月龄处死；给药（PTH）组12只，从3月龄开始给予PTH (1-34)（15μg/kg/d，每周5天），分别于6月龄和9月龄处死。采用Masson染色和Mankin评分来评估软骨的退变情况，采用双能X线骨密度仪测量股骨远端1/4和股骨内外侧髁软骨下骨的骨密度，免疫组织化学染色分析II型胶原（Type IICollagen,Col II）和基质金属蛋白酶-13（Matrix Metalloproteinase-13，MMP-13）的表达情况。2取健康1月龄豚鼠的膝关节表面软骨组织，采用胰酶消化法进行软骨细胞的培养。采用甲苯胺蓝染色法鉴定软骨细胞。MTT比色实验检测不同浓度PTH(1-34)对软骨细胞活力的影响，以确定实验药物浓度。10ng/ml人重组IL-1β干扰体外培养的正常豚鼠关节软骨细胞，诱导其发生OA软骨细胞样改变。第3代软骨细胞融合后分为3组，即空白对照组，IL-1β组和PTH10-7M组，然后通过Western blot法观察Col II和MMP-13的表达情况。结果1组织学和Mankin评分分析显示DH豚鼠于3月龄时自发形成OA并随着年龄的增加而严重，软骨下骨的骨密度逐渐升高，给予PTH (1-34)治疗后上述变化明显减轻，软骨下骨的性能也得以改善。免疫组化显示经PTH (1-34)治疗后软骨中的Col II表达增加而MMP-13表达减少。2体外分离培养的DH豚鼠软骨细胞增殖快，原代种植后2h左右即开始贴壁，10h后软骨细胞逐渐增大，呈圆形或多角形，2d左右即可密集成片，进行传代培养。较体外培养兔、大鼠、小鼠以及人膝软骨细胞的周期明显缩短，节省实验时间。3甲苯胺蓝染色：培养细胞呈异染性，证明培养的细胞为软骨细胞。4MTT实验结果：PTH (1-34)10-7M浓度组豚鼠软骨细胞的活性明显升高。5Western blot结果：IL-1β刺激后Col II水平较空白对照组明显降低，MMP-13水平明显升高，加入PTH (1-34)后，与IL-1β组相比，Col II水平升高，MMP-13水平降低。结论1PTH (1-34)对DH豚鼠关节软骨具有保护作用，可延缓OA的发生。2体外分离培养的豚鼠软骨细胞增殖快、周期短，是进行软骨细胞体外实验研究的理想选择。3PTH (1-34)作用于豚鼠软骨细胞的较佳浓度为10-7M，对体外IL-1β诱导的DH豚鼠软骨细胞也具有一定的保护作用。