白芨快速繁殖体系的建立

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白芨(Bletilla striata)是兰科(Orchidaceae)白芨属(Bletilla)多年生草本植物,具有较高的观赏与药用价值。本文以野生白芨种子为材料,采用TTC染色法研究了不同贮藏时间对白芨种子活力的影响;采用正交实验方法,分别以6-BA、NAA、TDZ和蜗牛酶浓度、温度以及处理时间为处理条件,研究了上述因子对种子无菌萌发的影响;分别用从白芨根分离出的9种真菌在燕麦培养基上与白芨种子共生培养,研究单一菌株对种子萌发的影响;以种子无菌培养出来的原球茎为材料,以正交设计法分析3种植物生长调节剂(6-BA、NAA、TDZ)对原球茎的增殖与分化的影响;同时探讨了不同基本培养基、不同浓度的活性炭和植物生长调节剂NAA对生根的影响;采用不同基质移栽试管苗,统计不同移栽基质配比条件下对白芨幼苗的成活率及生长状况。将从根部分离出来的A、B、C、F等4种菌种,以悬浮液的形式,接种到移栽试管苗的基质中,统计试管苗成活率和测量株高的生长量,探究共生真菌对白芨苗的移栽成活率及生长的影响。实验结果如下:1、种子的活力随着贮藏时间的增加,活力逐渐降低,但没有明显影响。贮藏时间为7d、30 d、60 d时,种子活力分别是95.2%、94.3%、93.5%。2、白芨种子在MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.03 mg/L TDZ的培养基下,萌发率可达91.6%,发芽率整齐。在水温25℃、处理40 min,浓度为3%蜗牛酶处理后,种子萌发率可达93.4%。分离的9种菌株中,菌株A、B、C和F有一定的提高种子萌发率的作用,菌株A萌发率23.5%、菌株B 22.6%、菌株C29.7%和菌株F 28.9%。菌株C处理的种子有少量长出第2片叶,可能对幼苗的生长有促进作用;D、E、G、H、I等5种菌株处理的种子萌发率均低于对照组。3、原球茎增殖的最适培养基为MS+0.4 mg/L NAA+0.9 mg/L 6-BA+0.06 mg/L TDZ,增殖率为123.4%,并且6-BA对原球茎增殖和分化作用显著,NAA和TDZ作用不显著;原球茎分化的最适培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+0.2 mg/LTDZ+1.5 mg/L NAA,分化率为69.4%;生根的最佳培养基为1/2MS+0.05%活性炭+0.5 mg/L NAA,生根率为97.3%。4、移栽30d后,试管苗的存活率相差不大,均能达到93.6%以上。但植株生长状况差别很大,以基质为树皮、刨花和锯末为3:6:1苗床的小苗,叶片开展,长势旺盛;A、B、C和F等4种菌株,对试管苗的成活率影响相差不大,分别为64.44%、68.89%、66.67%、62.22%。
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