烟碱型胆碱受体（nicotinic receptors,nAChR）广泛分布于自主神经节后和副交感神经支配的效应器官和组织，发挥极为重要的生理学功能和药理学作用。随着非神经源性胆碱系统和“胆碱能抗炎通路”认识的不断发展，nAChR在细胞调控中的作用日益受到关注。nAChR的所有亚型中，α7 N胆碱受体（α7 nicotinic acetylcholine receptor，α7nAChR）在包括肺癌在内的多种肿瘤组织中均有较高表达，而且与尼古丁有高度亲和力。尼古丁是烟草的主要成分之一，也是天然nAChR的激动剂。因而进一步阐明α7nAChR对肺癌细胞的调控及其相关信号通路将具有重要生物学和药理学意义。　　目前肺癌在全球的发病率和死亡率位居所有肿瘤前列。无论对于其发病因素还是死亡原因，吸烟都是其确定的高危因素，不仅能促使肺癌的发生，还在肺癌的恶变和转移中起重要作用。业已证实，尼古丁可通过激动nAChR参与调控肿瘤细胞多种活动包括增殖、存活、凋亡、迁移等，促使肿瘤细胞（包括肺癌细胞）的上皮间质化（epithelial mesenchymal transition，EMT）过程。然而，具有与尼古丁有高亲和力的α7nAChR在非小细胞肺癌（NSCLC）的侵袭和EMT中的作用迄今未见明确报道，α7nAChR对尼古丁所致肺癌侵袭及EMT调控的细胞信号通路也尚未完全阐明。　　本研究采用transwell荧光检测、RT-PCR、Westernblot等技术研究了NSCLC中多种 nAChR亚型的表达情况；同时，采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-ESI-MS/MS）的技术动态检测NSCLC细胞是否存在自分泌内源性乙酰胆碱作用。分析了激动、阻断或基因沉默α7nAChR所介导的尼古丁促NSCLC细胞侵袭作用；采用裸鼠接种技术研究α7nAChR对肿瘤的在体生长和侵袭功能；采用激光共聚焦、细胞免疫荧光、基因沉默、细胞高内涵等技术观察激动、阻断或基因下调α7nAChR对细胞形态、蛋白表达等EMT特征的作用，以及细胞EMT转变与侵袭力间的关系；采用Fluro4 AM钙荧光探针、Westernblot检测受体耦联的钙离子流信号变化以及受体依赖性细胞内信号转导途径。　　研究结果表明：　　1.在属于NSCLC的A549、H1299及PC9细胞中，α7nAChR高表达于A549和H1299细胞，PC9细胞上未见α7nAChR表达。A549细胞培养上清液中检测限以上未测到内源性乙酰胆碱。　　2.尼古丁能明显增强A549、H1299细胞的迁移侵袭能力，该作用能被α7nAChR特异性阻断剂α-银环蛇毒（α-BTX）或基因沉默α7nAChR后所逆转。　　3.尼古丁能使细胞发生EMT，促使其表型由上皮样转变为间质样细胞，同时使其胞浆内上皮、间质标志蛋白的表达发生改变。这一作用与α7nAChR上调、细胞侵袭力改变相关；阻断α7nAChR，能使细胞侵袭力及间质蛋白Vimentin的表达发生剂量依赖性抑制，基因下调α7nAChR表达，尼古丁引起的细胞侵袭增强和EMT过程能明显受到抑制。　　4.将α7nAChR基因沉默的H1299细胞接种于裸鼠，再给予其尼古丁时，裸鼠体内接种的肿瘤细胞生长与侵袭受到明显抑制。　　5.细胞内PI3-K/AKT及 Ras-Raf-MEK-ERK通路以及细胞内Ca2+变化介导了α7nAChR调控的细胞内信号转导途径。　　上述研究揭示了α7nAChR的活性调节可介导NSCLC细胞的侵袭力变化，并依赖于对NSCLC细胞EMT过程及间质蛋白表达量的调节；发现在NSCLC中α7nAChR调节细胞侵袭力和EMT过程主要通过 PI3-K/p-AKT/mTOR及Ras-Raf-MEK-p-ERK信号通路。该研究为阐明尼古丁和α7nAChR在肺癌细胞转移中的病理生理机制和和防治新靶点的研究提供了实验依据，亦为具有α7nAChR激动活性的新型化合物的研发和潜在应用提供了新的思路。