拜城盐山放线菌物种多样性及其抗植物病原真菌菌株的筛选

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本研究以拜城盐山土样为研究对象,采用免培养和可培养相结合的方法来分析拜城盐山放线菌的物种多样性,并获得盐山环境中的放线菌物种资源。以免培养所得到的放线菌多样性结果为基础来指导放线菌的分离培养,有针对性的获取新疆拜城盐山放线菌物种资源。以农业生产上危害较为严重的植物病原菌为靶标,筛选拮抗放线菌菌株,为极端环境下放线菌的开发利用提供技术支撑和菌种支持。得到如下结果:(1)利用PCR-RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制性片段长度多态性)免培养方法分析盐山样品中放线菌多样性。通过构建克隆文库,共得到216个放线菌克隆,分布于放线菌纲的两个亚纲中,即放线菌亚纲171个克隆,占总克隆数的79.2%;酸微菌亚纲45个克隆,占总克隆数的20.8%,所获得的16S rDNA基因序列与GenBank中已知的微球菌序列的最大相似度小于92%,为新的酸微菌亚纲的放线菌类群。样品中的优势放线菌为放线菌亚纲棒杆菌亚目诺卡氏菌科的红球菌属,占到克隆总数的51.9%。文库中的序列有24.5%的16S rDNA基因序列与已有效发表放线菌的序列相似性低于97%,代表着放线菌新的种类,部分序列形成了几个独立的进化分支,可能代表着具有更高分类地位的放线菌类群。(2)采用9种培养基以6种盐度梯度分离培养盐山样品中的放线菌。通过纯化培养,共获得35株放线菌。经过初步鉴定,这35株放线菌分布于放线菌目的4个亚目中。链孢囊菌亚目的菌株数量最多,其中拟诺卡氏菌属有17株;链霉菌亚目中的链霉菌属有4株,链单孢菌属有4株;放线多孢菌亚目中的放线多孢菌属有3株,盐放线孢菌属有3株;假诺卡氏菌亚目中的糖单孢菌属有4株。35株放线菌中的4株为潜在的放线菌新物种。(3)对从盐山样品中分离到的35株放线菌进行拮抗棉花枯萎病、棉花黄萎病以及辣椒疫霉病病原菌的筛选,其中的3株放线菌对这三种植物病原真菌具有很好的拮抗活性。
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