地衣（lichens）是由真菌（fungi）和藻类(algae)组成的互利共生的“二元”生物体，其中的藻类通常为绿藻，真菌多为子囊菌或担子菌。地衣体分布广泛，可适应多种极端环境。地衣内生菌主要生长于地衣体的髓层，且呈现出高度的物种多样性，目前，研究发现，分离培养的地衣内生菌产生的次生代谢产物具有多种重要的生物活性，如抗氧化、抗病虫害、抗菌、抗肿瘤、免疫抑制等，且很多化合物具有新颖的化学结构。本实验以浙江省清凉峰地衣为实验材料分离培养内生菌，实验结果显示了该地区地衣内生菌的物种多样性，并对地衣内生菌的次生代谢产物进行活性分析以及化合物的分离提取的初步研究。该研究一改往常的Yamomoto法采用独特的刮皮层挑取菌丝法对清凉峰19个属共168份地衣进行分离，共获得270株内生菌菌株。选取其中菌落形态、颜色差异较大的76株地衣内生真菌进行ITS和28S片段的序列测定。并通过GenBank数据库搜索，ClastalX1.83多重序列比对以及MEGA4.0最小进化(ME)法构建系统发育树，经鉴定，其中的75株内生真菌都属于子囊菌门（Ascomycota），另外1株属于担子菌门（Tremellomycetes）银耳目的无性型（mitosporic Tremellales）。子囊菌门的75株内生真菌分属于4个纲：座囊菌纲、散囊菌纲、锤舌菌纲和粪壳菌纲，9个目及其少数的地位未知的类群。其分类地位的鉴定表明清凉峰地衣内生真菌具有丰富的生物多样性。该实验中还分离到5株大团囊虫草属（Elaphocordyceps）内生菌菌株。实验室之前也曾有人从云南丽江老君山以及南极等地采集的地衣体标本中分离到多株大团囊虫草属真菌，从而显示了虫草属真菌以地衣体为宿主的的特殊性以及地衣虫草属真菌无区域限制性。虫草通过调节机体的免疫系统，以增强机体的免疫能力，可以抵御体内肿瘤细胞的生殖，清除机体坏死的细胞、组织，对外界的病毒、细菌等具抗菌作用，因此该大团囊虫草属菌株为开发抗菌药物提供了重要的生物新资源，具有较高的科研价值。对清凉峰分离得到的76株地衣内生真菌的次生代谢产物分别利用滤纸片法、96孔板法和MTT法进行抗细菌、真菌、抗肿瘤活性的筛选。其中，有5株菌株对鳗弧菌、大肠杆菌、枯草杆菌的抗菌能力较强，但对金黄色葡萄球菌的抗菌能力都较弱，有4株菌株对白色念珠菌有较强的抗菌能力，其中菌株20104794c的抗白念活性最强，其MIC为8μg/ml。抗肿瘤活性的筛选结果表明这些菌株都不具抗人乳腺癌细胞MCF-7生长的能力。将菌株20104730d进行发酵，获得菌株发酵液的乙酸乙酯粗提物，对该粗提物结合硅胶柱和凝胶柱层析以及高效液相进行单体化合物的分离提取，共分离得到两个已知化合物，分别为麦角甾醇(ergosterol)和过氧麦角甾醇(ergosterolperoxide)，其中过氧麦角甾醇具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、免疫抑制、对DNA拓扑异构酶活性的抑制作用等多种活性有很高的药用价值。