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关于B．t基因转化花椰菜已有不少报道，但很少有将CpTI基因转化花椰菜的研究报道。本实验以花椰菜为试材，通过植物基因工程获得抗虫转基因植株，主要的工作和结果如下： 1．花椰菜高频再生体系的建立 以4-7天花椰菜的子叶，下胚轴为外植体，MS为基本培养基，通过加入不同浓度和不同组合的6-BA，NAA，筛选出外植体不定芽分化的最适培养基(MS+BA2.0mg／L+NAA0.2mg／L)，并比较了两种不同外植体的分化能力，下胚轴的分化频率高于子叶。 2．花椰菜外植体对卡那霉素(Kan)的敏感性分析 在分化培养基中加入浓度为10mg／L的Kan时，外植体形成愈伤组织明显受到抑制，形成的愈伤组织也部分死亡；当Kan加入浓度为15mg／L时，外植体及形成的愈伤组织全部逐渐白化死亡；当浓度为30mg／L时，外植体未形成愈伤组织就白化死亡，因此以15mg／L Kan作为外植体的筛选压。 3．花椰菜外植体高频转化体系的建立 在最适培养基上试验了预培养时间、感菌时间、共培养时间等转化条件，建立了花椰菜外植体的高频转化体系：4-7天的子叶和下胚轴外植体，再生培养基上预培养3天，在用YEB液体培养基稀释10倍的菌液中感菌30-60秒，共培养2天后，立即转入含Carb的脱菌培养基(MS+6-BA2.0mg／L+NAA0.2mg／L+Carb500mg／L)中培养7-10天抑制农杆菌的生长，然后转入含Kan的筛选培养基(MS+6-BA 2.0mg／L+NAA0.2mg／L+Kan15mg／L+Carb300mg／L)中筛选抗性愈伤组织和抗性芽，每两周换一次培养基。逐渐降低Carb的浓度。经多次继代培养，淘汰未转化的“假转化体”，得到具有Kan抗性的转基因植株。 4．转基因植株的鉴定 提取转基因植株的总DNA，对其进行PCR扩增，大部分转化植株呈阳性，而非转化植株呈阴性；对PCR阳性植株进行PCR-Southern杂交和Southern杂交分析，转化植株都有特异杂交带，而对照无特异杂交带，结果证明CpTI基因已被整合到花椰菜的基因组中。同时对转化植株进行初步的离体叶片饲虫试验，结果显示转化植株具有一定的抗虫性。