CD4~+T细胞及淋巴细胞亚群在小儿哮喘与肺炎中的意义

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目的应用流式细胞技术检测哮喘及肺炎患儿外周血CD4+IFN-γ+Th1(以下简称Th1)、CD4+IL-4+Th2(以下简称Th2)、CD4+IL-17+Th17(以下简称Th17)、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)及淋巴细胞亚群。结合临床相关因素,研究分析各检测因子在小儿哮喘及肺炎患儿免疫方面的异同,从而探索CD4+T细胞四大亚群及淋巴细胞亚群在小儿哮喘及肺炎中的意义。方法在查阅文献及吸收既往研究经验的基础上自制统一调查问卷,对2010年09月-2012年02月住院的哮喘及肺炎患儿进行问卷调查。经过严格的纳入及排除标准,筛选符合要求的哮喘患儿15例、肺炎患儿17例,同期选择15例健康体检儿童为对照。于清晨取空腹静脉血2ml于4小时内进行标本处理,利用流式细胞仪检测外周血Th1、Th2、Th17、外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg及淋巴细胞亚群,结合临床相关检查资料,对检测结果采用SPSS18.0统计软件进行统计学分析,各组实验数据以均数±标准差(x±S)表示,各实验组间比较采用单因素方差分析,多重比较用LSD法;相关性分析采用Spearman方法,P<0.05为有统计学意义。结果实验结果1哮喘组患儿外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞的比率(7.58+2.75)%明显高于肺炎组(3.76±1.47)%及对照组(5.88+1.28)%,差异有统计学意义(F14.041,P=0.000)。Th1在3组间无明显统计学差异。哮喘组Th2(4.34±2.08)%的水平明显高于对照组(2.01+0.91)%及肺炎组[(1.61±0.74)%](F=6.685,P=0.003);哮喘组Th17(1.64±1.01)%的水平明显高于对照组(0.95±0.45)%及肺炎组[(0.94±0.51)%](F=4.590,P=0.016)。但是,Th2、Th17在肺炎与正常对照之间却无明显统计学差异(P>0.05)。哮喘组Th1/Th2(1.83±0.77)%比例较肺炎组(3.38±1.39)%(F=5.202,P=0.010)低,而Th17/Treg(0.20+0.10)%比例较肺炎组(0.364±0.23)%低,但是肺炎组Th17/Treg(0.36±0.23)%则较正常组(0.19±0.11)%(F=4.052,P=0.022)偏高。实验结果2哮喘组CD3+所占百分率明显低于对照组(F=2.772,P=0.040),差异有统计学意义。哮喘组及肺炎组CD4+所占百分率的水平均明显低于对照组(F=3.301;P=0.031,0.037)。哮喘组CD8+所占百分率明显低于对照组,差异有统计学意义。哮喘组CD16+56+的水平均明显低于对照组及肺炎组(F=3.833;P=0.041,0.011);哮喘组CD19+及CD4+/CD8+均较正常对照较正常组偏高(P<0.05),差异有统计学意义,而肺炎组CD19+及CD4+/CD8+的水平与正常对照比较无明显统计学差异。实验结果3白细胞及中性粒细胞比例在3组间无明显统计学差异(P>0.05);哮喘组淋巴细胞百分比较正常对照组低,有明显统计学差异(F=5.022,P=0.003)。哮喘组及肺炎组单核细胞百分比的水平均明显高于对照组。哮喘组嗜酸性粒细胞百分比(6.22±3.20)%明显高于对照组(2.62±0.79)%及肺炎组(0.47+0.29)%(P<0.01)。实验结果4CD4+T和淋巴细胞亚群与血常规之间存在明显的相关性。结论流式细胞仪检测CD4+T淋巴细胞内细胞因子(Th1/Th2/Th17)、 CD4+CD25+Foxp3+Treg及淋巴细胞亚群可作为判断哮喘及肺炎患儿免疫反应的检测指标。本研究结果提示小儿哮喘与肺炎患儿均存在着免疫失衡的问题,但是哮喘与肺炎患儿免疫特点有着明显的不同。哮喘组Th2、Th17、外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD19+、CD4+/CD8+、单核细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比均较正常组偏高,而Th1/Th2、CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+则较正常组偏低;而肺炎组仅有CD4+CD25+Foxp3+Treg、Th17/Treg及CD4+、单核细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比较正常组有所变化。由此可见,本研究中哮喘与肺炎患儿均存在着免疫失衡的问题,但是哮喘组患儿检测指标改变较肺炎更为明显,对两种疾病诊断、治疗及疗效观察具有较实用临床意义。
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