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非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD）是肝功能异常最常见的一种诱因，以甘油三酯（Triglyceride，TG）在肝细胞中的堆积为特征。脂代谢的稳态由一系列转录因子调控，包括核受体中的肝X受体（liver X receptors，LXRs）。LXRα （NR1H3）和LXRβ （NR1H2）是LXRs的两种亚型，它们通过激活脂代谢相关基因而启动肝脏脂质生成，这些靶基因包括固醇调节元件结合蛋白-1c (sterol-regulatory element binding protein1c，SREBP-1c)、脂肪酸合酶（fatty acid synthase，FAS）、碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate responsive element-binding protein，ChREBP)和乙酰CoA羧化酶（acetyl-CoA carboxylase，ACC）。因此抑制LXRs的表达和活性就有可能保护肝脏免受脂肪堆积所造成的损伤。MicroRNAs (miRs)是非编码小RNA（20-22个核苷酸），能结合到靶基因mRNA的3’非翻译区(3’-untranslatedregion，3’-UTR)，从而抑制基因的表达。在脂代谢的研究进展中，发现miRs在胆固醇和脂代谢的调控中发挥了重要作用。但是miRs是否能通过LXRs而影响肝脏脂质生成还未见报道。PartⅠ MicroRNA-1/206/613下调LXRα的分子机制及其对肝细胞脂质生成的抑制作用研究目的：在人肝细胞系中，探讨miR-1/206对LXRα的抑制作用，及这种作用可能存在的分子机制，并进一步揭示miR-1/206对LXRα诱导的脂质生成的影响。此外，已有报道证明miR-613可以直接下调LXRα，因此本文主要集中于研究miR-613对LXRα诱导的脂质生成的影响。方法及结果：1.在人肝细胞系中，经Real-time PCR证实miR-1/206/613可抑制LXRα mRNA的表达；经过Western blot证实miR-1/206/613可抑制LXRα蛋白的表达。对于miR-613，我们的实验结果与先前的报道相一致。2.我们经过在线生物信息学预测(TargetScan和PicTar)，发现在LXRα mRNA的3’-UTR上，miR-1/206/613存在相同的结合位点。经Luc报告基因活性检测证实miR-1/206/613可直接结合在LXRα3’-UTR中的预测结合位点。3.经Real-time PCR证实miR-1/206/613能够抑制LXRα下游脂质生成相关的靶基因（SREBP-1c、FAS、ChREBP和ACC1）的表达。这种抑制作用可以被LXRα表达质粒pEX-LXRα（不带3’-UTR）所拮抗，说明miR-1/206/613抑制脂质生成相关基因是通过抑制LXRα实现的。4.油红O染色显示miR-1/206/613能抑制肝细胞系中的脂滴堆积。这种抑制作用可以被LXRα表达质粒pEX-LXRα（不带3’-UTR）所拮抗，说明miR-1/206/613抑制肝细胞系中的脂滴堆积是由LXRα介导的。结论：在人肝细胞系中，miR-1/206/613通过直接结合在LXRα的3’-UTR上而抑制LXRα的表达和活性，同时抑制LXRα介导脂质生成。提示，“miR-1/206/613-LXRα”通路可能成为治疗脂质生成相关疾病的新靶点。PartⅡ MicroRNA-7/18下调LXRβ的分子机制研究目的：探讨miR-7/18对LXRβ的抑制作用及其可能的分子机制。方法及结果：1.在人肝细胞系中，经Real-time PCR证实miR-7/18可抑制LXRβ mRNA的表达；经过Western blot证实miR-7/18可抑制LXRβ蛋白的表达。2.经Luc报告基因活性检测证实miR-7/18可直接结合在LXRβ3’-UTR中的预测结合位点。结论：我们首次发现了miRs（miR-7/18）可直接结合LXRβ3’-UTR并抑制其表达，这为LXRβ表达与调控的分子机制提供了新视角。