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中医学“天人相应”认为人与自然界息息相关,人在作用于自然界的同时,也必然受自然界的影响。中医学认为人体是以五脏为中心的功能系统构成的有机整体,故人体五脏功能变化与自然界密切相关,即“五脏应时”。其中,“肺应秋”为“五脏应时”理论的一个重要组成部分。中医“肺应秋”理论主要是指人体肺功能在年周期变化中,适应自然界变化而做出相应调整,表现为肺的不同功能在一年的不同时段处于不同地位、发挥着不同的作用。对中医“肺应秋”理论的深入探讨与研究,有助于掌握肺功能的季节性变化,对呼吸系统季节性疾病的预防与治疗有着重要的临床指导价值,也有助于深化对肺脏象本质内涵的认识。1目的本研究通过文献与实验研究,以深化中医“肺应秋”理论及肺脏象本质内涵的认识。通过文献研究,揭示“肺应秋”宣发(卫外)、肃降功能的季节变化规律;通过实验研究,从内分泌免疫学角度,探索外周血TNF-α、IL-10以及肺组织褪黑素受体含量的四季变化,以揭示免疫功能及肺组织褪黑素受体季节变化规律,及松果腺对其调节作用;从而揭示中医“肺应秋”理论免疫学调节内涵。2方法2.1文献研究本研究采用文献资料法和逻辑分析法,把中医“肺应秋”理论置于年周期变化过程中,动态分析中医肺脏在一年中所发生的适应性改变和所发挥的适应性调控作用;把松果腺-褪黑素的时间节律与对肺相关免疫功能的调节作用相结合,深入分析松果腺-褪黑素在中医“肺应秋”理论中的地位与作用。2.2实验研究2.2.1实验动物健康Wistar大鼠(SPF级),雄性24只,体重150-170g,分别于2007年9月23日(秋分)、12月22日(冬至)、2008年3月20日(春分)和6月21日(夏至)前三十五天由北京维通利华实验动物技术有限公司购入。随机分为生理组、模型组(松果腺摘除组)和伪手术组,每组各8只。模型组、伪手术组大鼠分别于春分、秋分、夏至、冬至(简称二分、二至)前30天施行手术处理,与生理组大鼠在相同条件下饲养至二分、二至当日,于夜间20:30开始实验取材。饲养条件:自然光照,室温(冬春季室温为17℃±2℃,夏秋季室温为25℃±2℃),自由摄取水和饲料(饲料为普通鼠全价颗粒饲料由北京实验动物研究中心提供)。2.2.2检测方法血清TNF-α、IL-10以及肺组织褪黑素受体含量均采用酶联免疫吸附实验(ELISA)进行测定。2.2.3实验结果统计学分析方法用SPSS13.0统计分析软件处理数据。各组数据均采用均数±标准差((?)±s)表示;各季节组内及四季各组间比较均采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)检验(P<0.05为差异显著,P<0.01为差异十分显著)。3结果3.1文献研究结果3.1.1中医“肺应秋”理论是指肺与秋气相通应,肺气旺于秋,在秋季肺肃降功能处于支配地位,宣发卫外作用相对较弱;在其他季节,肺应时而变,处于从属地位,其宣发、肃降功能需配合“主时之脏”做出相应调整,发挥或协同或抑制作用。3.1.2松果腺分泌合成褪黑素具有时间节律,褪黑素对肺相关免疫功能具有调节作用,故松果腺-褪黑素在中医“肺应秋”理论的生理机制中居于不可替代的重要地位,并发挥着高位调节作用。3.2实验研究结果3.2.1在正常生理状态下,大鼠外周血TNF-α含量四季生理组比较,夏至、秋分与冬至比较,均有极显著性差异(P<0.01);夏至、秋分与春分比较,均有显著差异(P<0.05)。大鼠外周血TNF-α含量表现出冬春高于夏秋的季节变化节律。大鼠外周血IL-10含量秋分、春分与冬至比较,均有极显著性差异(P<0.01),IL-10含量全年表现为冬至高于秋春的季节变化节律。大鼠肺组织褪黑素受体含量四季生理组春分、冬至与秋分比较,均有显著差异(P<0.05)。大鼠肺组织褪黑素受体表现为春冬高于秋分的季节变化节律。3.2.2大鼠外周血TNF-α含量四季模型组(松果腺摘除组)夏至与冬至比较,有显著性差异(P<0.05),秋分与冬至比较,有极显著性差异(P<0.01);秋分与春分比较,有非常显著差异(P<0.01),也表现出冬春高于夏秋的季节变化节律。而同一季节三组之间比较,冬至时,模型组与生理组比较,有显著性差异(P<0.05),生理组与伪手术组比较,差异不显著(P>0.05)。大鼠外周血IL-10含量模型组(松果腺摘除组)季节性变化,无显著性差异(P>0.05)。同一季节三组之间比较,冬至时,模型组与生理组比较,有极显著性差异(P<0.01),生理组与伪手术组比较,差异不显著(P>0.05)。而大鼠肺组织褪黑素受体含量四季模型组(松果腺摘除组)夏至与春分比较,有显著性差异(P<0.05),冬至与春分比较,有极显著性差异(P<0.01),表现出春高于夏冬的季节变化节律,与生理组四季变化节律不同。同一季节三组之间比较,秋分时,模型组与生理组比较,有显著性差异(P<0.05),生理组与伪手术组比较,差异不显著(P>0.05),松果腺摘除对大鼠肺组织褪黑素受体含量影响在秋分时影响显著。4结论4.1中医“肺应秋”宣发(卫外)、肃降功能随自然界变化而发生适应性改变。即在秋季肺肃降功能处于支配地位,宣发卫外功能相对较弱;在其他季节,肺应时而变,处于从属地位,其宣发、肃降功能需配合“主时之脏”做出相应调整,发挥或协同或抑制作用。4.2外周血免疫因子TNF-α、IL-10存在季节变化规律。在正常生理状态下,大鼠外周血TNF-α存在冬春高于夏秋的季节变化节律,IL-10存在冬季高于秋春的季节变化节律。这暗示着TNF-α异常升高可能与临床上冬春两季哮喘、肺部感染、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺纤维化及肺心病等多种肺部疾病发病相关;IL-10春秋显著降低与春秋两季急性肺损伤、慢性阻塞性肺病、肺炎支原体感染等多种肺部疾病发病相关。4.3大鼠肺组织褪黑素受体含量变化存在春冬高于秋分的季节变化节律。摘除松果腺后,褪黑素受体含量季节性变化节律紊乱,且在秋分时,松果腺-褪黑素对肺组织褪黑素受体发挥着极为重要的调节作用,在其他季节则不显著。4.4松果腺对机体免疫功能及肺组织褪黑素受体含量的调节作用具有季节选择性。冬至时,松果腺对机体免疫功能(TNF-α、IL-10)具有上调作用,而在秋分时对肺组织褪黑素受体具有下调作用。4.5中医“肺应秋”理论的免疫调节机制与松果腺的调节作用密切相关。松果腺分泌褪黑素通过与褪黑素受体结合发挥其重要的高位调节作用,其具体调节机制有待进一步研究。