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[目的]大多数局麻药通过弥散作用阻滞细胞膜上的钠离子通道产生麻醉作用。QX-314 (N-(2,6-Dimethylphenylcarbamoylmethyl)triethylammonium bromide,N-二乙氨基乙酰基-2,6-二甲基苯胺)是利多卡因的衍生物,单独应用低浓度的QX-314不易透过细胞膜,但通过辣椒素激活TRPV1 (transient receptor potential vanilliod 1,瞬时受体电位香草酸亚型1)受体通道后可使QX-314进入伤害性感受器细胞内发挥持久的镇痛作用且运动功能不受影响。QX-314-OH是新合成的QX-314羟基化合物,布比卡因也是TRPV1受体通道的激动剂之一,我们以往的实验研究发现低浓度(15mM)QX-314-OH(QX)与低浓度(1mM)左旋布比卡因(Levobupivacaine, LB)合用能产生理想的镇痛效果。本实验拟研究低浓度的QX-314-0H与低浓度的左旋布比卡因合用(QX合LB)产生麻醉效果的可能机制(有哪些受体或通道参与两者的镇痛作用)。[方法]分别选用TRPV1受体拮抗剂(Capsazepine)、TRPA1(瞬时受体电位离子通道A1)受体拮抗剂(HC030031)、HCN通道(超极化激活环核苷酸门控阳离子通道)拮抗剂(ZD7288)、HCN通道激动剂(Forskolin)、FAAH(脂肪酸酰胺水解酶)抑制剂(URB937)、CB1(大麻素受体1)拮抗剂(AM251)、CB2(大麻素受体2)拮抗剂(AM630)、溶剂DMSO (二甲基亚砜)、溶剂TW80(聚山梨酯80)注入SD大鼠腹腔,30min后再与QX和／或LB合用进行大鼠坐骨神经阻滞(sciatic nerve block, SNB),观察大鼠的感觉及运动阻滞情况。将160只SD大鼠随机分为20组：15mMQX单用组(n=8)、1 Mm LB单用组(n=8)、2mMLB单用组(n=8)、3 mM LB单用组(n=8)、15 mM QX合1 mM LB组(n=8)、10mg/kg URB937加15 mM QX合用组(n=8), 10mg/kg URB937加1 mM LB合用组(n=8), 10mg/kg URB937加2 mM LB合用组(n=8)、10mg/kg URB937加3 mM LB合用组(n=8); 7.5mg/kg CPZ加QX合LB组(n=8),8mg/kg HC030031加QX合LB组(n=8)、3mg/kg Forskolin与QX合LB组(n=8)、5mg/kg ZD7288加QX合LB组(n=8)、 3mg/kg AM251加QX合LB组(n=8)、10mg/kg AM251加QX合LB组(n=8)、3mg/kg AM630加QX合LB组(n=8)、3mg/kg URB937加QX合LB组(n=8)、0mg/kg URB937加QX合LB组(n=8);2ml/kg DMS0加QX合LB组(n=8)及2ml/kg [TW80:乙醇：H2O=1：3：16]混合液加QX合LB组(n=8)。单用组在坐骨神经阻滞前无需从腹腔中给予受体激动剂及拮抗剂。给药后观察各组感觉及运动功能阻滞的起效率、起效时间和持续时间；感觉功能及运动功能阻滞分别用热缩足反射潜伏期(paw withdrawal latency of hot plate test, PWL)和后肢伸肌蹬踏试验(postural extensor thrust, PET)评价；并在给药后的第1,3,7,14天取坐骨神经病理标本,并对坐骨神经标本进行HE染色和髓鞘染色,在光镜下观察是否存在病理学损伤。[结果]1、15mM QX及1 mM LB单用时,与自身基础值比较不能阻滞大鼠的感觉及运动功能；但15 mM QX与1 mM LB合用后,感觉及运动功能均被阻滞且维持时间较长(感觉阻滞p值分别为0.001和0.001,运动阻滞p值分别为0.000和0.000)。2、TRPV1受体拮抗剂(Capsazepine)加15 mM QX和1 mM LB组的感觉及运动功能阻滞与15 mM QX和1 mM LB合用组(QX合LB组)比较,其起效时间差异无统计学意义(P>0.05),但感觉及运动功能阻滞的维持时间缩短(P<0.05)；HC030031加15 mM QX和1 mM LB合用后,感觉及运动功能阻滞与QX合LB组比较,起效时间差异无统计学意义(P>0.05),但感觉及运动功阻滞的维持时间缩短,与QX合LB组比较差异有统计学意义(P<0.05)。3、ZD7288加QX合LB组的感觉及运动功能阻滞与QX合LB组比较,其起效时间差异无统计学意义,但感觉神经阻滞时间延长,与QX合LB组比较差异有统计学意义(P<0.05),对运动神经阻滞时间延长不明显,差异无统计学意义(P>0.05); Forskolin加QX合LB的感觉及运动功能阻滞的起效时间与QX合LB组差异比较差异无统计学意义(P>0.05),但感觉及运动功能阻滞的维持时间缩短(P<0.05)。4、URB937与15mM QX和1 Mm LB的感觉及运动功能阻滞与QX合LB组比较,其起效时间差异无统计学意义(P>0.05),但感觉及运动功能持续时间延长,与QX合LB组比较差异有统计学意义(P<0.05); URB937加15 mM QX组与15 mM QX单用组比较,其对感觉功能及运动功能的阻滞的差异有统计学意义(P<0.05)。URB937与不同浓度的LB (1 mM,2mM,3 mM)合用与相应浓度的LB组比较,对感觉功能的阻滞仅与3 mM LB合用时差异有统计学意义(P<0.05),对运动功能的阻滞仅与2 Mm LB合用时差异有统计学意义(P<0.05)；AM251或AM630与15 mM QX和1 mM LB合用组合用后,感觉及运动功能阻滞与15 mMQX和1 mM LB合用组比较,起效时间及持续时间差异无统计学意义(P>0.05)。5.神经毒性观察：光镜下观察每组各时期的坐骨神经无明显损伤,未见神经脱髓鞘及坏死；各组第1天坐骨神经有不同程度炎性细胞浸润,但在第3天、7天、14天坐骨神经无明显的炎性细胞浸润。[结论]1、低浓度(15 mM) QX-314-OH与低浓度(1mM)左旋布比卡因合用能明显阻滞感觉及运动功能,产生确切的麻醉效果。2.TRPV1及TRPA1受体参与QX-314-OH与左旋布比卡因合用的麻醉效果,拮抗剂使其感觉及运动功能阻滞时间缩短。3、超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN通道)是QX-314-OH与左旋布比卡因合用的产生麻醉效果的通道之一,其激动剂能缩短QX-314-OH与左旋布比卡因合用的麻醉作用时间,而拮抗剂能延长感觉及运动功能阻滞的持续时间。4、内源性大麻素水解酶抑制剂URB937可延长QX-314-OH与左旋布比卡因合用时感觉及运动功能阻滞时间,其机制可能与大麻素(AEA)激活TRPV1受体有关;大麻素受体-1(CB1)和大麻素受体-2(CB2)对QX-314-OH与左旋布比卡因合用时的感觉及运动功能并没有影响。5.15 mM QX-314-OH与1mM左旋布比卡因合用或者此浓度的QX-314-OH与左旋布比卡因复合其他受体或通道的激动剂及拮抗剂,对坐骨神经均无明显的神经毒性。