舒芬太尼对小鼠坐骨神经损伤后脊髓L4-6节段和坐骨神经Bcl-2和Caspase-3表达的影响

来源 :内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaojian1990
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目的:  观察舒芬太尼对小鼠周围神经损伤后脊髓L4-6节段和坐骨神经损伤局部神经细胞凋亡的影响以及对该两处组织Bcl-2、Caspase-3表达的影响,初步探讨舒芬太尼对小鼠周围神经损伤修复的影响。  方法:  健康Balb/c小鼠400只,随机分为五组,空白对照组(Blank组)、环孢素组(CsA组)、舒芬太尼高(H组)、中(M组)和低剂量组(L组)。建立小鼠坐骨神经损伤模型,术后分组腹腔注射给药。于术后第1d、3d、5d、1w、2w、4w、8w、12w分别观察小鼠大体情况和手术切口愈合情况,处死小鼠取术侧吻合口上下坐骨神经共5mm和脊髓L4-L6节段,分别标记后每组制作石蜡切片进行HE染色置于光学显微镜下观察,做Western-Blot和Real-time PCR检测Bcl-2和Caspase-3蛋白质和mRNA的表达,然后对所得数据进行统计分析。  结果:  1.大体观察,各组小鼠坐骨神经损伤后均表现为右后肢拖拽样行走,其余肢体活动正常,术后第1w小鼠右后肢足底开始出现不同面积的溃疡,空白对照组最明显,空白对照组手术切口免疫炎性反应明显,而环孢素组和舒芬太尼组不显著。  2.HE染色光学显微镜下观察坐骨神经标本,环孢素组和舒芬太尼组在术后第8w神经纤维排列和分布比空白对照组整齐和有规则。  3.Western-Blot结果:各时间点各组与空白对照组相比,Bcl-2蛋白的表达均高,而Caspase-3蛋白的表达均低,尤其是在术后第2w,P<0.05,差异有统计学意义。  4.Real-time PCR结果:各时间点各组与空白对照组相比,Bcl-2 mRNA的表达均高,而Caspase-3 mRNA的表达均低,尤其是在术后第2w。  结论:  1.小鼠坐骨神经损伤后,损伤局部有免疫炎性反应产生,其过度表达时不利于周围神经损伤后的修复,坐骨神经损伤局部和脊髓L4-6节段均有神经细胞凋亡的存在,两处组织均有Bcl-2和Caspase-3的表达。  2.使用舒芬太尼干预后,坐骨神经损伤局部及脊髓L4-6节段组织Bcl-2的表达上调,Caspase-3的表达下调,舒芬太尼的剂量与二者的表达调节程度有一定的量效关系,使用舒芬太尼干预在坐骨神经损伤后第2w抑制神经细胞凋亡效果最明显。  3.舒芬太尼对周围神经损伤有一定保护作用,并可能是通过抑制炎性反应过度表达,调节神经损伤局部及相应脊髓节段组织Bcl-2和Caspase-3的表达,抑制神经细胞凋亡,减轻神经损伤,从而间接地达到促进神经损伤修复的作用。
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