卵巢癌患者血清中肿瘤特异标志物的鉴定研究

来源 :中国协和医科大学 中国医学科学院 北京协和医学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:X22521
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  本研究通过双向凝胶电泳技术分析卵巢癌患者和正常健康妇女血清中的蛋白质组分,寻找可能的卵巢肿瘤相关蛋白,并对该蛋白进行进一步鉴定研究,以期确定一个可作为卵巢癌血清学诊断的特异标志物。   采用双向凝胶电泳分离6例卵巢癌患者及2例正常健康妇女血清总蛋白,经考马斯亮蓝染色后对比发现:卵巢癌患者血清中有3-4个蛋白组分含量高于正常健康妇女血清,其中增加最明显的一个蛋白分子量约为45kDa,等电点约为5.1。   该蛋白斑点经蛋白酶水解后进行液质联用串联质谱(LC-MS/MS)分析,并进行数据库检索,表明该蛋白可能为人结合珠蛋白。   以结合珠蛋白作为候选的卵巢癌相关蛋白,采用免疫印迹、ELISA分析该蛋白在12例卵巢癌患者血清中及2例正常健康妇女血清中的含量,其平均值分别为2.36±1.01,1.08±0.24mg/ml,结果表明结合珠蛋白含量在卵巢癌患者血清中有增高的趋势。   利用对岩藻糖特异亲和的Lotustetragonolobus凝集素,对11例卵巢癌患者血清和2例正常健康妇女血清进行凝集素亲和后免疫印迹及凝集素斑点印迹分析,以鉴定其中特异的岩藻糖基化结合珠蛋白成分。结果表明卵巢癌患者血清中的岩藻糖基化结合珠蛋白含量明显高于正常健康妇女,在凝集素斑点印迹分析中其斑点平均灰度分别是154.18%±32.73%,42%±4.2%。   本研究结果表明结合珠蛋白和岩藻糖基化结合珠蛋白在卵巢癌患者血清中的含量有高于正常健康妇女的趋势,而且结果表明检测岩藻糖基化成分显示的差异比检测结合珠蛋白显示的差异更明显,其作为卵巢癌血清标志物的临床应用的可行性值得进一步研究。
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