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褐飞虱(Nilaparvata lugens Stal.)是水稻的主要害虫之一，其发生与危害严重影响稻谷的产量。褐飞虱能很快适应水稻新品种，往往导致抗性水稻品种的推广和应用受到制约；此外，由于褐飞虱防治长期以化学防治为主，使褐飞虱对许多农药产生了抗性。昆虫的CYP4、CYP6家族的P450常被报道受植物次生物质和杀虫剂的诱导，并参与相应底物的代谢。为深入研究褐飞虱细胞色素P450的解毒机制，我们开展了有关褐飞虱细胞色素P450的研究工作，现总结如下：
1.褐飞虱P450基因的克隆和序列分析
采用简并RT-PCR技术与RACE技术相结合，克隆了褐飞虱的三个P450cDNA全长：CYP4C62、CYP4CE1、CYP6CS1。其中CYP4C62全长为2146bp，有48bp的5’端非翻译区，535bp的3’端非翻译区，编码520个氨基酸的多肽。CYP4CE1全长为2160bp，有372bp的5’端非翻译区，160bp的3’端非翻译区，编码541个氨基酸的多肽。CYP6CS1全长为2700bp，有89bp的5’端非翻译区，1063bp的3’端非翻译区，编码515个氨基酸的多肽。三个新的P450基因的氨基酸序列比对发现，它们都含有昆虫P450基因的保守特征序列如螺旋K的保守序列W---R，血红素结合区F--G-R-C-G/A等。氨基酸序列相似性分析表明，CYP4C62与CYP4CE1有38％的同源性。CYP6CS1与黑凤蝶的CYP681具有较高的同源性。
2.取食抗性水稻褐飞虱的mRNA表达量的比较
以B-actin为参照基因，采用荧光实时定量PCR技术比较褐飞虱CYP4C62、CYP4CE1、CYP6CS1三个基因在取食感虫水稻与抗性水稻后的表达量差异。结果表明，取食抗性水稻后，CYP4CE1有1.8倍的过量表达，而CYP6CS1有接近70倍的过量表达，CYP4C62则没有过量表达。由此推断CYP4CE1、CYP6CS1可能参与了水稻次生物质的代谢。
3.褐飞虱P450 mRNA在肠道组织的原位杂交定位
通过体外转录获得正反义链RNA探针，以正义链探针为对照，对褐飞虱肠道组织进行整体原位杂交检测。结果显示CYP4CE1、CYP6CS1在前肠、中肠及后肠区段都检测到杂交信号，而CYP4C62没有检测到信号。此结果进一步证明了CYP4CE1、CYP6CS1可能只在消化道组织表达，其产物则参与褐飞虱取食抗性水稻后的解毒过程，而CYP4C62与解毒无关。