【摘 要】
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目的:探索右美托咪定（dexmedetomidine,DEX）通过Wnt/β-catenin信号通路以及紧密连接蛋白对SD大鼠脓毒症肠道黏膜损伤产生保护作用的机理,为临床实践中肠源性脓毒症的治疗和器官保护提供理论基础。方法:选择60只适龄SD雄性大鼠,随机分为三组（对照组、脓毒症组以及右美托咪定组,每组20只）。脓毒症组、DEX组结扎盲肠并穿孔建立模型。DEX组给予腹腔注射40μg/kg DEX,
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目的:探索右美托咪定（dexmedetomidine,DEX）通过Wnt/β-catenin信号通路以及紧密连接蛋白对SD大鼠脓毒症肠道黏膜损伤产生保护作用的机理,为临床实践中肠源性脓毒症的治疗和器官保护提供理论基础。方法:选择60只适龄SD雄性大鼠,随机分为三组（对照组、脓毒症组以及右美托咪定组,每组20只）。脓毒症组、DEX组结扎盲肠并穿孔建立模型。DEX组给予腹腔注射40μg/kg DEX,同时对照组以及脓毒症组给予等量0.9%氯化钠腹腔注射,采用HE染色直接观察评价SD大鼠肠黏膜的病理学改变;在末次给药24h后尾静脉采血1.5ml,参照ELISA试剂盒说明中的方法,测定血清中炎症因子白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）水平;采用Western blot检测肠道组织Wnt 3a蛋白、β-连环蛋白（β-catenin）细胞周期蛋白（cyclin D1）以及闭锁蛋白（zonula occludens 1,ZO-1）、闭合蛋白（Occludin）的表达量;并通过免疫组化染色验证Wnt 3a蛋白、β-连环蛋白（β-catenin）细胞周期蛋白（cyclin D1）的表达结果。结果:HE染色观察脓毒症大鼠肠道黏膜损伤情况较为严重,而DEX组大鼠肠道黏膜损伤明显改善。ELISA数值结果显示脓毒症组较对照组血清中白介素-1β（570.05±83.93）、肿瘤坏死因子-α（212.34±40.87）、白介素-6（8.48±0.31）pg/ml水平显著升高,而DEX组较脓毒症组这三种炎性因子表达水平显著降低,白介素-1β（386.58±92.50）、肿瘤坏死因子-α（84.68±7.09）、白介素-6（4.67±0.91）,差异具有显著性（P＜0.05）。Wb结果条带灰度值分析提示脓毒症组中Wnt 3a（0.296±0.007）、β-catenin（0.259±0.008）及cyclin D1（0.337±0.006）蛋白的表达量较对照组升高明显,ZO-1（0.259±0.008）、Occludin（0.111±0.005）蛋白表达量降低明显,其差异具有显著性（P＜0.05）,给予DEX腹腔注射后Wnt 3a（0.211±0.003）、β-catenin（0.322±0.005）及cyclin D1（0.196±0.011）蛋白表达水平均降低,ZO-1（0.58±0.012）、Occludin（0.169±0.01）蛋白表达量均升高,差异具有显著性（P＜0.05）。Wnt 3a、β-catenin、cyclin D1免疫组化染色结果观察大鼠肠黏膜蛋白染色情况与Wb实验结果相同。结论:DEX影响Wnt/β-catenin信号通路减少相关炎症因子白介素-1β、肿瘤坏死因子-α、白介素-6的表达,增加紧密连接蛋白的表达,进而改善肠源性脓毒症,维持肠黏膜屏障功能。
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