人逼尿肌细胞β-肾上腺素能受体单一基因亚型细胞克隆的构建 膀胱逼尿肌活动亢进是下尿路症状的常见原因，临床上表现为尿频、尿急和急迫性尿失禁，是膀胱储尿功能障碍的表现。最近研究发现，β肾上腺素能受体(β-adrenoceptor，β-AR)亚型能够介导膀胱平滑肌松弛，对维持储尿过程中膀胱良好的顺应性起着关键作用。但究竟哪一种β-AR亚型介导逼尿肌松弛，国内外学者还有一定的争论。为进一步探讨β-AR亚型在逼尿肌中功能奠定基础，我们拟采用反义基因(antisense)技术，构建β-AR亚型的iRNA干涉分子，封闭三种β-AR中的任意两个，得到表达单一亚型的细胞克隆，再进一步进行研究，以确定β-AR激活对逼尿肌细胞的松弛和增殖的影响，并为寻找新的最终解决膀胱逼尿肌活动亢进的治疗方法提供理论依据。 第一部分 膀胱平滑肌细胞的培养和鉴定 前言 建立膀胱平滑肌细胞的培养方法、获得大量具有正常生物学特性的细胞是深入研究细胞生物学特性和构建组织工程膀胱的必要条件。近年来，F-H．Ma等对人膀胱平滑肌细胞进行了体外培养，并对β肾上腺素能受体分布进行了初步的研究，但没有对平滑肌细胞中β肾上腺素能受体生物学特性进行描述。为了更进一步深入研究人膀胱平滑肌细胞中β肾上腺素能受体的生物学机制，本研究进行了体外人膀胱平滑肌细胞培养，并进行形态学及生物学特性观察。我们采用胶原酶消化法自标本分离出膀胱平滑肌细胞进行培养并予鉴定，现报告如下。