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γ-癸内酯是香精香料行业广泛应用的一种调香原料,利用生物法生产的Y-癸内酯产品更为天然、安全,是目前的发展趋势。本文以从自然界筛选可转化蓖麻油生成Y-癸内酯的酵母菌株J1为出发菌株,利用原生质体紫外诱变技术提高γ-癸内酯的转化率,,研究了微生物二次转化法制备β-癸内酯的新工艺以及γ-癸内酯的提取及检测方法,主要结论如下。1.从桃树林土壤及桃子表面筛选能够利用蓖麻油生成γ-癸内酯的菌种,经初筛、复筛确定酵母菌J1和J2具有分解蓖麻油的能力,与保藏的酿酒酵母、解脂假丝酵母、耐酒精酵母进行比较,酵母菌J1对蓖麻油的转化率最高,经初步鉴定,J1为子囊菌纲、酵母目、酵母科、毕赤酵母属。2.以J1为出发菌株进行原生质体紫外诱变,确定了原生质体形成和诱变的最佳条件：菌龄16h,酶解浓度1%,酶解时间50min,酶解温度28℃,15W紫外灯,30cm处照射25min。经初筛和复筛,得到γ-癸内酯高产菌株M6,该菌株遗传稳定性良好,最适生长温度为30℃,最适生长pH为5-6。利用该菌株进行发酵,以蓖麻油为底物,Y-癸内酯产量达到1.25g/L,比出发菌株提高了28.8%。3.确定了一次转化菌株M6的发酵培养基为：蓖麻油4%,葡萄糖15g/L,酵母浸出汁2.5g/L,蛋白胨2.5g/L,KH2PO41.2g/L,MgSO40.3g/L,Na2HPO41.0g/L,表面活性剂0.4%；培养条件为：培养温度30℃,接种量10%,装液量50mL/250mL,摇床转速200r/min,起始pH6.0。二次转化中,按8%接种量,接种一次转化12h的转化液进行二次转化试验。4.分别以丙酮、乙酸乙酯、四氯化碳、正己烷及乙醚等不同有机溶剂对γ-癸内酯进行提取,结果表明,正己烷的萃取效果最好,含量达到1.58g/L。超临界萃取的最佳条件为：温度30℃,压力10MPa,时间1.5h,此时γ-癸内酯产量达到2.98g/L比有机溶剂萃取法提高了88.6%,转化率达到30.5%,该方法更为安全高效,利于实现天然香料的绿色生产。