山楂多糖的提取纯化、表征及其体外抗氧化活性研究

来源 :淮阴工学院 | 被引量 : 3次 | 上传用户:sz398143634
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山楂(Crataegus pinnatifida Bunge)为蔷薇科灌木,其果实不仅酸甜可口、富含多种活性成分,也是我国传统的药食两用的植物之一。目前对于山楂的研究主要集中于其中黄酮类成分的研究,而对山楂多糖的研究较少。鉴于此,为进一步开发山楂资源及深入研究山楂多糖提供理论依据,本课题以山楂为原料,优化提取山楂多糖,通过分离纯化得到纯化组分,并对纯化组分的理化性质、结构特征和体外抗氧化活性进行研究,主要研究成果如下:1山楂多糖的提取工艺研究以山楂为实验原料,选择液料比、超声时间、p H值、加酶量、酶反应时间及反应温度进行单因素实验。在此基础上,设计进行三因素三水平的响应面实验,并利用Design expert软件对实验数据进行回归分析,得到提取的最佳工艺条件为:液料比30:1 m L/g,酶反应时间66 min,酶反应温度52℃,山楂粗多糖提取率的实际值为10.39%。并通过与热水提取法、超声提取法、酶提取法的提取效果进行比较,证明超声耦合酶法多糖提取率更高。同时,结构分析结果表明,四种提取方法得到的粗多糖的主要单糖组成均为鼠李糖、木糖、葡萄糖和半乳糖,而热水提取得到的粗多糖分子量最高。2山楂多糖的分离纯化、理化性质及结构分析以脱色率和多糖保留率为指标,选择脱色时间、脱色温度、p H值及加酶量进行单因素实验,研究AB-8树脂对山楂粗多糖溶液的脱色效果,优化得到最佳脱色工艺参数:脱色温度40℃、脱色时间1.5 h、p H值5及树脂加入量0.6 g。并通过与活性炭脱色、凹土脱色法和过氧化氢脱色法比较,证实了树脂脱色率高、多糖保留率高的优点。采用DEAE-52阴离子交换树脂分级纯化山楂粗多糖,得到三个纯化组分:CPP-1、CPP-2及CPP-3。分别应用硫酸-蒽酮法、考马斯亮蓝法、硫酸-咔唑法和离子色谱法测定纯化组分的总糖含量、蛋白质含量、糖醛酸含量及硫酸基含量。综合利用化学方法及现代分析仪器(UV、IR、GC、HPGPC)研究多糖的特征官能团、单糖组成、分子量等结构信息。3山楂多糖的体外抗氧化活性研究通过测定ABTS自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、Fe2+螯和能力、抑制脂质过氧化能力和还原能力以评价山楂粗多糖及纯化组分的体外抗氧化能力。结果表明山楂粗多糖较纯化组分表现出更强的抗氧化能力,而纯化组分中,CPP-2抗氧化能力最强。
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