云南昆明 650200克班宁(Crebanin,Cre)主要存在于防己科千金藤属(Stephania,Ste)的部分植物中,属异喹啉类阿朴菲型(aporphine)生物碱。对Cre的前期研究表明：Cre为单体,有效成分明确,药效学显示Cre具有多种药理活性<[1-4]>,静脉给药能降低结扎大鼠冠状动脉所致心律失常发生率和持续时间；能明显地推迟大鼠心肌缺血再灌注损伤所致心律失常发生的时间,并缩短心律失常的持续时间；Cre能缩短在缺血期间I/R的评分值；Cre可使心肌MDA含量明显降低,同时使心肌组织SOD、GSH.PX活性明显升高；能缩小心肌缺血范围及梗死面积。本课题旨在改变给药途径,从抗心肌缺血的角度进一步探讨克班宁对心血管的作用,探讨其作为抗心肌缺血药的可行性；同时对Cre不同给药途径的安全性进行评价。 目的：探讨Cre口服给药途径的抗心肌缺血作用及可能的机制,评价不同给药途径的安全性,进一步开发异喹啉类化合物在心血管疾病方面的应用。 方法：口服灌胃Cre采用Bliss法求出小鼠灌胃给药的LD50；采用皮下注射异丙肾上腺素(Iso)增加小鼠心肌耗氧,以普萘洛尔(Pro)为阳性对照,生理盐水(NS)为阴性对照,口服给药观察Cre5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg三个剂量,一次给药,及连续7天给药对小鼠常压耐缺氧的影响；采用异丙肾上腺素(Iso)造成急性小鼠心肌缺血模型,设立克班宁组(Cre,10mg/kg)、阳性对照组(普萘洛尔)、模型组、正常组,观察小鼠心肌病理改变；采用异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血模型,设立克班宁组(Cre,10mg/kg)、阳性对照组(普萘洛尔)、模型组,口服给药观察大鼠给药前后及组间心肌缺血心电图的变化,并在描记心电后测定大鼠血清SOD、MDA及NO的活性；采用垂体后叶素(Pit)造成大鼠急性心肌缺血模型,设立克班宁组(Cre,10mg/kg)、阳性对照组(硝酸甘油)、模型组,口服给药观察大鼠给药前后及组间心肌缺血心电图的变化,并在描记心电后测定大鼠血小板聚集率；采用静脉给药方式,设立克班宁5mg/kg、2.5mg/kg、1.25mg/kg三个剂量组及阴性对照组(5﹪葡萄糖),观察Cre对中枢系统、心血管系统的影响。 结果： 1、Cre的急性毒性试验：小鼠灌胃给药后,用B1iss法求得Cre灌胃给药途径LDso约为70.32±0.02mg/kg,LD<,50>的95﹪可信区间为63.20～78.25mg/kg。 2、Cre对Iso增加小鼠心肌耗氧存活时间的影响:与NS组比较,普萘洛尔(Pro,13mg/kg)组小鼠的耐缺氧生存时间明显延长,经统计学处理差异具有非常显著性意义(P<0.01)；Cre高剂量(20mg/kg)1天组与NS组比较差异具有显著性意义(P<0.05),Cre中剂量(10mg/kg)7天组0.050.05)。 3、Cre对Iso所致小鼠急性心肌缺血模型心肌细胞的病理组织学影响:从病理切片来看,正常对照组心肌细胞形态正常；模型组心肌细胞水肿变性伴充血；Pro组部分心肌细胞水肿变性；Cre7天组部分心肌细胞水肿变性。 4、Cre对Iso所致急性心肌缺血模型大鼠的影响：从心电图观察,同模型组相比,Cre对lso造成的心肌缺血的对抗作用不明显,虽有延缓心肌发生严重缺血的趋势,经统计学处理差异无显著性意义(P>0.05)；但可以明显推迟因缺血导致的心律失常发生时间,并减少心律失常发生率(P<0.01)。 5、Cre对Iso所致急性心肌缺血模型大鼠血清SOD、MDA及No活性的影响:同模型组相比Pro组及Cre组血清中SOD活性显著升高,经统计学处理差异具有显著性意义(P<0.05)；同模型组相比Pro组及Cfe组血清中MDA含量虽稍有下降,但经统计学处理差异无显著性意义；与模型组比较Pro组及Cre组血清中NO含量虽有升高趋势,但经统计学处理差异无显著性意义(P>0.05)。 6、Cre对Pit所致急性心肌缺血模型大鼠的影响:同模型组比较,Cre对Pil造成大鼠急性心肌缺血的对抗作用不明显；经统计学处理差异无显著性意义(P>0.05)。 7、Cre对Pit所致急性心肌缺血模型大鼠血小板聚集的影响:同模型组比较,硝酸甘油组及Cre组大鼠血浆血小板的聚集率在统计学上差异无显著性意义(P>0.05)。 8、Cre静脉给药对中枢神经系统的影响:同对照组比较,Cre各剂量组对小鼠的步态、肌紧张等一般行为无影响(P>0.05)；Cre能计量依赖性增加小鼠翻正反射消失例数,经统计学处理差异具有非常显著性意义(P<0.01)；Cre高、中剂量组能明显减少小鼠自主活动次数(P<0.01),低剂量组自主活动虽然有减少的趋势,经统计学处理差异无显著性意义(P>0.05)。 9、Cre静脉给药对大鼠心血管系统的影响：实验结果表明,各组动物给药后30秒,克班宁能明显降低大鼠的收缩压、舒张压、平均动脉压及减慢心率,与对照组相比,差异有非常显著性意义(P<0.05,P<0.01),且在给药后1min,只有Cre5mg/kg对大鼠的舒张压和平均动脉压有明显影响,与对照组相比有显著性意义(P<0.05),在给药后5min、10min及20min对血压及心率无明显影响；对大鼠心电图研究结果表明,在给药20min后克班宁对实验动物心电图各指标都无明显影响。 结论： 1、Cre口服给药具有一定毒性,毒性小于静脉给药,LD<,50>约为70.32±0.02mg/kg,安全范围较静脉给药明显提高； 2、Cre20mg/kg1次口服预防性给药可延长Iso增加心肌耗氧小鼠的常压耐缺氧存活时间； 3、Crelomg/kg连续7天口服预防性给药对Iso所致急性心肌缺血小鼠的心肌细胞有一定的保护作用； 4、Crelomg/kg连续7天口服预防性给药可减少Iso所致急性心肌缺血所引发的大鼠心律失常的发生率； 5、Crelomg/kg连续7天口服预防性给药可提高Iso所致急性心肌缺血大鼠血清SOD活性； 6、Crelomg/kg连续7天口服预防性给药对垂体后叶素所致急性心肌缺血模型大鼠心肌缺血的发生无明显对抗作用； 7、Crelomg/kg连续7天口服预防性给药对大鼠体内血小板聚集无明显影响； 8、Cre在1.25-5mg/kg剂量范围内静脉给药对小鼠的步态、肌紧张等一般行为无影响； 9、Cre在1/25-5mg/kg剂量范围内静脉给药可增强戊巴比妥钠阈下剂量对小鼠的催眠作用,并且具有一定的镇静作用； 10、Cre在1.25-5mg/kg剂量范围内静脉给药30秒后能明显降低大鼠心脏收缩压、舒张压、平均动脉压及减慢心率,作用迅速,持续时间短暂5分钟以后对心血管的作用基本消失,无明显不良影响； 11、Cre在1.25-5mg/kg剂量范围内静脉给药20min后对实验动物心电图各指标无明显影响。