不同途径移植脂肪来源干细胞治疗大鼠肝硬化模型的实验研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:edward109
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目的:比较不同途径移植脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)治疗肝硬化大鼠模型的疗效。方法:从健康SD雄性大鼠腹腔脂肪组织提取ADSCs,纯化、培养并稳定传至第3代,经流式细胞术鉴定后,作为细胞移植治疗肝硬化SD雄性大鼠的种子细胞。50只SD雄性大鼠,设正常对照组(G1,n=10),其余40只采用四氯化碳与橄榄油混合液腹腔注射法建立肝硬化SD雄性大鼠模型,并随机分为:肝硬化模型对照组(G2,n=10)、门静脉移植组(G3,n=10)、肝动脉移植组(G4,n=10)、脾动脉移植组(G5,n=10),其中G1又分为G1a(细胞移植前处死正常对照组,n=5)、G1b(细胞移植后处死正常对照组,n=5),G2又分为G2a(细胞移植前处死模型对照组,n=5)、G2b(细胞移植后处死模型对照组,n=5);造模8周后处死G1a及G2a大鼠,取出肝脏组织做病理检查,观察是否造模成功;造模成功后G3、G4及G5分别经门静脉、肝动脉及脾动脉途径,注入ADSCs悬液1ml(细胞数约1x106)。分别于细胞移植前、移植后第4周、移植后第8周跟踪检测G1b、G2b、G3、G4及G5大鼠肝功能(包括ALB、TBIL、ALT、AST);细胞移植后第8周处死全部大鼠,取出肝脏组织做病理检查并进行肝纤维化组织学半定量计分。结果:从脂肪组织中分离培养的第3代细胞高表达ADSCs表面标记分子CD29(90.88%),CD44(96.24%),CD90(95.52%),极低表达造血细胞表面分子CD34(0.08%),CD45(0.34%);G1a与G2a进行肝纤维化程度比较P<0.05,有统计学意义;细胞移植4周后,与G2b比较,G3、G4、G53组大鼠肝功能均得到明显改善,血清白蛋白显著升高(P <0.05),转氨酶、胆红素显著降低(P <0.05),肝纤维化程度显著减轻(P <0.05);G3及G4大鼠肝功能改善及肝纤维化减轻程度优于G5(P <0.05),前两者之间无显著性差异(P>0.05)。结论:1.贴壁筛选法能便捷地从脂肪组织中分离培养出高纯度的ADSCs;2.CCl4与橄榄油混合液腹腔注射法可成功诱导出肝硬化模型;3.经门静脉、肝动脉及脾动脉三种途径移植ADSCs治疗肝硬化大鼠均可减轻肝纤维化程度,改善肝功能,门静脉及肝动脉移植途径略优于脾动脉移植途径,并且前两者之间无明显差异。
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