siRNA靶向干扰APE1基因对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响

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目的探索siRNA干扰APE1基因表达对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法将实验分为APE1siRNA组(转染APE1siRNA表达质粒)、control组(转染空质粒)与negative组(不转染任何质粒)三组,按照分组分别转染入人脑胶质瘤细胞U251细胞系,应用western blot杂交检测APE1的表达变化,MTT法及AO/EB染色观察脑胶质瘤细胞的增殖与凋亡情况。结果转染后,western blot检测显示APE1siRNA组的APE1表达(0.223±0.017)较negative组(0.914±0.076)及control组(0.836±0.048)显著降低,差异具有显著性(P<0.05)。MTT法测得APE1siRNA组0、24、48、72、96h的细胞生长吸光值分别为0.452±0.006,0.513±0.021,0.673±0.055,0.883±0.077,1.125±0.096,与control组(0.451±0.006,0.723±0.002,1.092±0.042,1.521±0.060,1.734±0.034)和negative组(0.452±0.007,0.710±0.015,1.102±0.066,1.543±0.063,1.781±0.066)相比,自转染24h后,APE1siRNA组中的细胞生长受抑明显,差异均有显著性。control组与negative组之间无显著性差异,AO/EB染色显示APE1siRNA组的凋亡率(31%)较negative组(3%)及control组(7%)高,差异具有显著性。negative组与control组相比无显著性差异。结论本实验应用RNA干扰技术将APE1siRNA表达质粒成功导入进人胶质瘤细胞后能够降低APE1在细胞中的表达,证实了APE1蛋白的降低可以抑制胶质瘤细胞的增殖并可促进其凋亡。
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