BCMA (B cell maturation antigen)是由185个氨基酸残基组成的III型跨膜蛋白。它属于TNF受体家族成员,与其配体B细胞激活因子BAFF (B cell activating factor belonging to the TNF family)或增殖诱导配体APRIL (a proliferation-inducing ligand)结合可刺激B细胞增生。BCMA在B细胞的增殖、发育以及在一些B细胞系肿瘤和自身免疫性疾病中的作用有待进一步研究。本项目拟制备BCMA抗体,检测BCMA在自身免疫性疾病患者B细胞表面和血清中的表达是否异常,探讨BCMA与自身免疫性疾病的相关性。通过RT-PCR方法从Raji细胞的总RNA中扩增BCMA的全长cDNA,克隆入原核表达载体pET-28a(+)、pGEX-4T-1。pET-28a(+)-BCMA在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,主要以包涵体形式存在于沉淀中。pGEX-4T-1-BCMA在大肠杆菌DH5a中表达为可溶性蛋白,但是用该可溶性BCMA蛋白免疫小鼠6周后,采血进行流式细胞检测发现免疫血清不能识别Raji细胞表面的BCMA蛋白。我们又从BCMA胞外区氨基酸序列中选取12个氨基酸,合成多肽BCMA-12aa,免疫新西兰大白兔,得到了多克隆抗体,Western blot检测发现所得多克隆抗体能够识别多肽BCMA-12aa、可溶性和包涵体形式的BCMA,但是仍不能识别Raji细胞表面的BCMA蛋白。下一步,建议采用酵母或者真核条件表达有生物活性的BCMA,制备该蛋白的单、多克隆抗体,为自身免疫性疾病和B细胞系肿瘤的基础与临床研究提供有力的工具。