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微小RNA(microRNA,miRNA)是一类在动植物中均有表达的长度约21-25nt的非编码RNA,通常与靶基因的mRNAs的3’端非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)互补结合,参与许多编码基因表达的转录后调控;通过形成沉默复合物,而参与RNA沉默。迄今为止,在人类基因组中已发现了数以千计的miRNAs,大约50%的蛋白质编码基因受其调控,形成了一个转录后水平的调控网络。MiRNAs在很多重要的生物学过程中起着调节作用,如细胞增殖、凋亡、分化及迁移等。MiRNAs的表达和代谢异常,通常会引发多种疾病,比如肿瘤,一些miRNAs的异常表达(过表达,低表达)可能导致肿瘤的发生和发展,即其可作为癌基因或抑癌基因而发挥作用。研究表明在胃癌的发生发展过程中miRNAs发挥了至关重要的调节作用。为了进一步研究miRNAs在胃癌发生发展中的功能与机制,通过对胃癌组织和癌旁正常组织中差异表达的miRNAs进行筛选,发现miR-193b的表达具有显著差异。Cyclin D1(CCND1)属于高度保守的细胞周期家族成员。该家族的蛋白丰度在整个细胞周期中具有周期性变化。该基因出现异常表达或突变都会影响细胞周期的进程,这可能是它影响多种肿瘤发生发展的最主要的机制。研究表明miR-193b在肿瘤中可通过靶向CCND1而发挥抑癌基因的作用。目的:研究miR-193b在胃癌发生发展中的功能和机制。材料方法:我们用Real-time PCR的方法对50对胃癌组织(C)和癌旁正常组织(N)中的miR-193b的表达进行检测,并对C/N的值进行统计,取cutoff=1.5。用细胞转染的方法在两种胃癌细胞系HGC-27和MGC-803中转入miR-193b过表达载体,并用Real-time PCR验证其表达上调情况:在此基础之上,我们用细胞增殖实验检测miR-193b对胃癌细胞增殖能力的影响;划痕实验及侵袭实验用于检测miR-193b对胃癌细胞迁移能力的影响。并用Western blot实验检测过表达miR-193b对细胞中CCND1蛋白表达的影响。在miR-193b的机制研究中,我们用RNAi的方法对HGC-27和MGC-803细胞中的CCND1蛋白表达进行干预,并用Western blot验证siCCND1对CCND1的敲低效率,并用细胞增殖实验检测CCND1对HGC-27和MGC-803细胞增殖能力的影响。结果:miR-193b在胃癌组织中的表达比癌旁正常组织中的表达低。而且miR-193b低表达与pTNM分期(stageI/II vs III/IV)相关。我们的进一步研究表明miR-193b可以抑制HGC-27和MGC-803细胞的增殖,迁移和侵袭,对细胞周期也有一定的影响。而且miR-193b可直接作用于CCND1,即miR-193b可抑制CCND1的表达,并且在HGC-27和MGC-803细胞用siCCND1将CCND1表达降低后,两种胃癌细胞系的细胞增殖能力的下降。以上结果提示miR-193b在胃癌中的抗癌作用可能是通过靶向CCND1实现的。结论:miR-193b通过靶向作用于cyclin D1而抑制胃癌细胞的增殖、侵袭、转移能力。