大动脉闭塞所致急性缺血性脑卒中患者血清生物标志物的蛋白组学分析

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目的:大动脉闭塞(Large Vessel Occlusion,LVO)所致急性缺血性脑卒中(Acute Ischemic Stroke,AIS)是一种严重的脑血管疾病之一,本研究主要应用蛋白组学技术检测和筛选出有助于LVO所致AIS患者早期诊断和预后评估的生物标志物,并探讨了相关标志物与颅内动脉侧枝循环优劣的相关性,为临床医师对LVO所致AIS患者的管理提供新的思路。  方法:本研究选取LVO所致AIS患者40例(脑卒中1组)和同期健康志愿者20例(正常1组),采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)结合液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)的蛋白组学技术,鉴定出脑卒中1组和正常1组的差异表达蛋白,另前瞻性选取了LVO所致AIS患者33例(脑卒中2组)和同期健康志愿者(正常2组)33例,利用Western blot法验证了差异表达蛋白中的PPBP、THBS-1、LYVE1、IGF2四种上调蛋白,并且绘制ROC曲线,计算曲线下面积,用logistic回归分析探讨了差异表达蛋白PPBP、THBS-1、LYVE1、IGF2血清表达水平与患者的诊断和预后的相关性。  结果:利用蛋白组学技术筛选出脑卒中1组和正常1组差异表达蛋白共7种,其中4种蛋白表达上调,3种蛋白表达下调。利用Western blot方法验证了4种表达上调的蛋白PPBP、THBS-1、LYVE1、IGF2在脑卒中2组和正常2组血清中表达水平的变化与蛋白组学结果相一致。因为这4种差异蛋白已被证实与凝血和内皮功能相关,所以我们进一步探讨了这些蛋白与LVO所致AIS的早期诊断,预后评估及颅内侧枝循环优劣的相关性。绘制ROC曲线得出曲线下面积IGF2为0.731(0.609~0.853),LYVE1为0.813(0.707~0.919),PPBP为0.754(0.638~0.870),THBS-1为0.769(0.652~0.652),且P值均小于0.05,表明这些蛋白可能成为早期识别LVO所致AIS的潜在标志物。此外,根据logistic回归分析发现LYVE1和IGF2的血浆表达水平越高,侧枝循环越好,预后越好;THBS-1的血浆表达水平越高,侧枝循环越差,预后越差;PPBP对于侧枝循环及预后评估没有显著意义。  结论:1.差异表达蛋白PPBP、THBS-1、LYVE1、IGF2可能作为LVO所致AIS早期诊断的潜在标志物。2.差异表达蛋白THBS-1、LYVE1、IGF2可以作为侧枝循环及预后评估的生物标志物。这些差异表达蛋白可能为脑卒中的管理提供新的方法。
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