酵母β-葡聚糖是一种重要的细胞壁结构多糖,具有多种生物活性功能。酵母β-葡聚糖广泛应用于医疗、食品以及化妆品等领域,成为近年来研究的热点。本研究基于提高酿酒酵母细胞壁中葡聚糖含量,在酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CEN.PK.2C-1中过量表达了细菌来源的β-1,6-葡聚糖合酶基因gsmA,以及葡萄糖-6-磷酸变位酶基因PGM2和葡聚糖合酶（GS）的调控亚基基因RHO1。在此基础上,通过优化培养基条件,进一步提高了酿酒酵母菌中β-葡聚糖的产量。另外,本研究基于提高酵母β-葡聚糖在水中的溶解度,以大肠杆菌（Escherichia coli）为宿主,异源表达了β-1,3-葡聚糖水解酶Gly5m和β-1,6-葡聚糖水解酶BT3312。通过两种不同β-葡聚糖水解酶的水解作用,酵母β-葡聚糖水溶性得到显著提高。本研究主要研究结论如下:（1）过量表达异源葡聚糖合酶基因以及葡聚糖合成途径关键酶基因提高葡聚糖含量。在S.cerevisiae CEN.PK.2C-1中异源表达β-1,6-葡聚糖合酶基因gsmA,重组菌株S-gsmA细胞壁中葡聚糖含量为58.2±2.9 mg·g^-1,与对照菌株S1(40.7±2.1 mg·g^-1)相比增长43.0%。在此基础上,分别在菌株S-gsmA中过量表达葡萄糖-6-磷酸变位酶基因PGM2和葡聚糖合酶（GS）的调控亚基基因RHO1,重组菌G-PGM2和G-RHO1细胞壁中葡聚糖含量分别提高了22.5%和30.0%。（2）优化培养基条件提高葡聚糖含量。将细胞壁中葡聚糖含量最高的重组菌株G-RHO1在含有5%NaCl的SD培养基中培养后,其细胞壁中葡聚糖含量显著提高,与不含NaCl的对照相比,提高了53.8%。（3）β-葡聚糖水解酶在E.coli中的表达。在E.coli中克隆和表达了β-1,3-葡聚糖水解酶Gly5m和β-1,6-葡聚糖BT3312。在25?C条件下,添加0.2 mM IPTG诱导4 h后,重组酶Gly5m达到最高酶活,为1086 U·mL^-1;在25?C条件下,添加0.2 mM IPTG诱导后8 h后,重组酶BT3312达到最高酶活,为2355 U·m L^-1。（4）酵母β-葡聚糖寡糖的酶法制备。通过β-1,3-葡聚糖水解酶Gly5m和β-1,6-葡聚糖水解酶BT3312水解大分子酵母β-葡聚糖制备小分子葡聚糖寡糖,提高了葡聚糖在水中的溶解度。酵母β-葡聚糖经过Gly5m和BT3312水解后,溶解率分别提高了2.6倍和2.4倍。采用Gly5m和BT3312共同水解,酵母β-葡聚糖溶解率提高了3.2倍(水溶性酵母葡聚糖的浓度为12.5 g·L^-1)。