作为与胴体的产量及品质有重要关系的两个组织—肌肉与脂肪,彼此紧密的关联不仅影响自身的代谢,也影响了整个动物机体的能量代谢与稳态。但对于它们之间的相互作用了解的不多,尤其在猪上。外泌体(Exosome)是动物系统调节、远端调节和旁分泌调节的一个新的重要载体和效应物。本研究以猪原代骨骼肌卫星细胞和原代脂肪前体细胞为研究对象,通过提取骨骼肌卫星细胞上清的外泌体,处理脂肪前体细胞,检测其增殖与分化情况;同时利用胰岛素或油酸处理骨骼肌卫星细胞,提取肌肉外泌体,检测调节物干预后的肌肉外泌体对脂肪生成的作用;并且采用miRNA高通量测序法检测了肌肉与脂肪外泌体中miRNA的组成,并验证了相关差异miRNA的作用;试验结果如下:1.将猪肌肉细胞外泌体提取出来后处理猪脂肪前体细胞,发现脂肪前体细胞的增殖受到了抑制。同时,分化诱导脂肪细胞8天至成熟,通过油红O染色和甘油三酯测定,结果显示肌肉细胞外泌体对脂肪前体细胞的分化具有抑制作用。荧光定量PCR和Western Blot结果显示,分化聚酯相关基因和蛋白质的表达量均呈现显著性下调(p<0.05)。2.经过胰岛素或油酸处理骨骼肌卫星细胞后,提取上清中的外泌体,处理脂肪前体细胞后,分化诱导至成熟。通过油红O染色和甘油三酯测定,结果显示受胰岛素或者油酸处理后肌肉细胞外泌体对脂肪前体细胞的分化无抑制作用。同时,荧光定量PCR和Western Blot结果显示,与非处理的肌肉外泌体组相比,其分化聚酯相关基因和蛋白质的表达量显著上升(p<0.05)。3.将肌肉细胞和脂肪细胞的外泌体分别进行高通量检测,发现了30个miRNAs在肌肉外泌体中的含量显著高于脂肪外泌体(p<0.05),其中差异最显著的是ssc-miR-146a-5p。用肌肉外泌体处理脂肪前体细胞,经诱导分化后,stem-loop定量PCR结果显示,ssc-miR-146a-5p的表达量显著升高(p<0.05),与实验室前期报道结果一致。4.ssc-miR-146a-5p inhibitor/iNC与肌肉外泌体共处理脂肪前体细胞后,油红O染色和甘油三酯测定结果显示,加入了ssc-miR-146a-5p inhibitor后,肌肉外泌体对脂肪前体细胞的分化无抑制作用;荧光定量PCR和Western Blot结果显示,与对照组相比,聚酯相关基因和蛋白质的表达无显著性变化。综上所述,本研究结果发现,肌肉外泌体对脂肪前体细胞的分化聚酯具有显著的抑制作用;通过胰岛素或油酸处理骨骼肌卫星细胞后,其分泌的外泌体失去了对脂肪前体细胞的抑制作用;其中,ssc-miR-146a-5p是肌肉外泌体抑制脂肪前体细胞分化的关键miRNA。研究成果对后期深入研究猪肉品质性状的形成以及猪营养代谢症的健康调控机制提供了良好的理论基础。