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食醋是家庭生活中常见的酿造调味品,不仅营养成分丰富,还有独特的药理作用。其诸多功能越来越为人们所认识,它已不仅仅是简单的调味品。因此,现在人们对食醋的需求量不断的上升,对其质量也提出了更高的要求。目前,食醋的生产仍主要采用传统的分批发酵方法,很多食品调味厂也因生产技术落后、产品质量低下而停止生产;故提高食醋的产量与质量,提高企业生产效率不容忽视。应用微生物固定化技术进行食醋生产是改变现状的一条有效途径。本文基于微生物固定化技术的特点,对各技术环节即细胞固定化条件、固定化细胞发酵及贮藏稳定性、响应面法优化糖化、酒精发酵、醋酸发酵工艺参数等方面进行了研究,同时对固定化细胞反应进行设计,为生产应用提供依据,其主要研究结果如下。(1)以海藻酸钠为载体,采用包埋法固定化酿酒酵母,研究细胞固定化条件。确定了固定化的最优条件为海藻酸钠浓度为3%,氯化钙浓度为1%。在此条件下,能够获得机械强度较好(13.31g/mm~2)、包埋量较大(1.05×108个/颗)的固定化颗粒。(2)利用固定化最优条件分别制作固定化黑曲霉细胞、固定化酿酒酵母细胞、固定化醋酸杆菌细胞;固定化黑曲霉颗粒在连续使用5批次(15d)过程中,酶活相对比较稳定,在贮藏3个月后仍能保持较好的发酵性能;固定化酿酒酵母在连续使用8批次(24d)过程中,酒精含量相对稳定;在贮藏40d前,发酵性能较稳定,40d后其活性开始下降;固定化醋酸杆菌在连续进行5轮(20d)发酵过程中,产酸量无明显波动,贮藏后发酵性能有所下降,产酸速率下降,但最终产酸量均能达到贮藏前的水平,只是发酵时间延长。(3)分别利用各固定化细胞进行发酵,在单因素实验基础上,分别以糖化酶活力、酒精含量、产酸量为响应指标,应用响应面法的Box—Behnken试验设计优化糖化、酒精发酵、醋酸发酵工艺参数,建立多元二次回归方程。获得糖化工艺的最优条件为:培养温度34.1℃,起始pH值6.02,装液量72.6mL;酒精发酵的最优条件为:起始pH值4.25,接种量9.21%(w/v),发酵温度29.02℃;固定化醋酸杆菌发酵的最佳条件为:接种量7.88%(w/v),底物浓度4.63%,发酵温度32℃。对各模型进行试验验证可知,得到的发酵条件参数可靠,具有实用价值。(4)设计了一个由3个工作体积均为3.5L的玻璃发酵罐组成的细胞生物反应器,可用于进行放大试验。