目的通过外源性的一氧化氮刺激,对口腔鳞状细胞癌细胞观察其电镜下的改变,细胞毒性的测试、通过超螺旋敏感定量PCR(ss-qPCR)测定线粒体DNA(mtDNA)结构的改变的研究,为因氮化应激引发的口腔癌的预防和治疗提供新的辅助方法。方法选用口腔癌中发病率较高,恶性程度比较强的口腔鳞状细胞癌scc-25细胞株作为实验模型,以不同浓度的SIN-1诱导细胞出现RNS反应,观察SIN-1在0.5mM,1mM,1.5mM,2mM剂量组,分别刺激时间为15min,1h,3h,6h,12h,24h,48h,72h时对细胞的影响,采用超螺旋敏感PCR检测新技术分析mtDNA损伤情况和拷贝数的变化情况。采用MTT方法检测细胞的活性。结果与没加任何刺激的口腔鳞状细胞癌细胞相比在SIN-1为0.5mM刺激时几乎没有反应;在1mM,1.5mM的浓度下连续性的刺激细胞,细胞在电镜下观察形态上没有发生明显的变化,在mtDNA的损伤程度上有了些许的变化,但随着时间的延长mtDNA的损伤程度有了恢复,但拷贝数降低说明细胞有了不可逆的损伤;而在2mM的刺激下,细胞有了明显的形态改变,mtDNA的损伤程度有明显的统计学意义,并且mtDNA的拷贝数有明显的降低现象。结论本实验通过外源性的氮化刺激,诱导出口腔鳞状细胞癌细胞出现氧化损伤产生氮化应激反应,在刺激持续加强的作用下造成mtDNA的损伤和拷贝数的动态变化。同时结合细胞的活性检测的结果分析说明,口腔鳞状细胞癌细胞对氧化损伤比较敏感,而氧化损伤是致癌的主要因素,将对口腔鳞状细胞癌的早期发现提供新的方向。